【摘 要】
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将猪囊虫磷蛋白P2基因克隆到毕赤酵母表达系统分泌性表达载体pPIC9K中,构建了重组表达载体pPIC9K-P2.经测序证明基因序列完全正确,从而大量制备重组质粒pPIC9K-P2,并用SalⅠ
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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将猪囊虫磷蛋白P2基因克隆到毕赤酵母表达系统分泌性表达载体pPIC9K中,构建了重组表达载体pPIC9K-P2.经测序证明基因序列完全正确,从而大量制备重组质粒pPIC9K-P2,并用SalⅠ、 BglⅡ两种内切酶分别线性化,然后分别电转化毕赤酵母菌种GS115,采用G418抗性梯度筛选得到高拷贝重组菌株,利用MM和MD培养基鉴定重组菌株Mut表型,然后用甲醇进行诱导表达;并对表达产物通过SDS-PAGE、Western-blot和ELISA分析,结果表明,重组菌株成功地分泌表达了分子量大小为12.6kD
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