【摘 要】
:
目的 观察人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因体外转染对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)bFGF表达的影响.方法 密度梯度离心、贴壁法培养分离SD雄性大鼠MSCs,体外扩增,流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达.利用慢病毒载体系统介导将具有人源性bFGF基因转染至第2代MSCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后细胞形态和生长的变化,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法
【机 构】
:
350005,福州,福建医科大学附属第一医院血管外科,福建医科大学血管与腔内血管外科研究室,350005,福州,福建医科大学附属第一医院血管外科,福建医科大学血管与腔内血管外科研究室,350005,福
论文部分内容阅读
目的 观察人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因体外转染对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)bFGF表达的影响.方法 密度梯度离心、贴壁法培养分离SD雄性大鼠MSCs,体外扩增,流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达.利用慢病毒载体系统介导将具有人源性bFGF基因转染至第2代MSCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后细胞形态和生长的变化,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法鉴定bFGF在MSCs中的表达.结果 密度梯度离心、贴壁法培养分离可获得MSCs,P3代大鼠细胞利用流式细胞仪检测CD11b/c阳性细胞表达率为(13.2±0.6)%,CD34阳性细胞表达率为(1.2±0.5)%,CD44阳性细胞表达率(97.8±0.9)%,CD90阳性细胞表达率(96.8±1.4)%.MSCs转染48 h后,绿色荧光蛋白的表达明显增强.RT-PCR证实转基因MSCs表达bFGF mRNA明显增强,Western blot检测证实转基因MSCs在49 KDr出现特异性条带,而空白和空载组的MSCs则未见阳性条带.结论 采用慢病毒介导的基因转染技术可以将bFGF基因转染至MSCs中,并有外源性bFGFmRNA和蛋白的有效表达,MSCs可作为bFGF基因治疗的载体。
其他文献
目的 探讨C225是否能增敏顺铂对激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3的抑制作用及其机制.方法 对比空白对照组、顺铂单药组及顺铂联合C225组三者前列腺癌细胞表皮生长因子受体(EGFR)及pEGFR表达水平间的差异,并通过噻唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验、细胞同质黏附实验、流式细胞技术、透射电镜等实验技术,观察药物对各组细胞增殖、凋亡、细胞周期、侵袭能力等生物学行为的影响,通过酶联免疫吸
目的 检测血管内皮生长因子(VEGF)-C在肝癌组织中的表达,探讨肝癌生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测新鲜的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中VEGF-C的mRNA表达,经GelproAnalyzer 3.1软件分析RT-PCR产物的吸光度(A),计算VEGF-C的A值与内参照基因(GAPDH)A值
目的 观察Survivin-FK(Sur-Fk)基因治疗小鼠胃癌的效果.方法 将FK-cDNA插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点,用Survivin基因启动子替代pcDNA3.1质粒的巨细胞病毒(CMV)启动子,构建成Survivin-Fk重组质粒.用脂质体法将Sur-Fk基因转染到胃癌细胞SGC-7901;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot检测转染的效果,并进行转基
目的 探讨大鼠坐骨神经异体神经移植后联合应用FK506(他克莫司)及神经干细胞(NSCs)的可行性。方法制造大鼠坐骨神经缺损模型,异体神经移植修复;根据分组不施加干预因素、吻合口注入NSCs、腹腔注射FK506,通过运动及感觉评分、电生理检测、组织学检查,以及免疫组织化学染色,观察神经再生差异。结果同时应用FK506及NSCs组,感觉及运动评分(5.32±1.43),神经传导速度(20.52±1.
目的 分析食管胃结合部腺癌(AEG)的淋巴结转移规律,为其手术范围提供参考依据。方法 选择我院1989年1月至2010年12月行根治性切除手术的食管胃结合部腺癌119例,记录每例患者的淋巴结数目和大小,计算淋巴结总数和平均值,计算总体淋巴结转移率以及分组淋巴结转移率。结果 119例手术标本共检出淋巴结6537枚(30 ~ 157枚),平均(54.93±19.20)枚/例。119例中89例有淋巴结转
使用闭合复位髓内固定技术治疗股骨粗隆间骨折具有创伤小,手术时间短,内固定稳定性高等优点[1-2]。亚洲型股骨近端防旋髓内钉(PFNA-Ⅱ)是在股骨近端防旋髓内钉( PFNA)基础上,针对亚洲人群改良的防旋髓内钉。我院自2010年3月至2010年9月,使用PFNA-Ⅱ治疗42例高龄股骨粗隆间骨折患者,疗效较好。 一、资料与方法 1.一般资料:本组42例,其中男11例,女31例;年龄69 ~ 91岁,
随着科技的发展,医学模式的转变,各学科间的联系越来越紧密而广泛.转化医学(translational medicine)是近年来国际医学科学领域出现的新概念,并正从概念逐渐转为热门的研究模式,其核心是将生物医学基础研究成果迅速有效地转化为可应用于临床的理论、技术、方法和药物。
本研究旨在探讨可降解多孔聚乳酸材料在骺板组织工程中的应用,现报道如下. 一、材料与方法 1.材料:可降解多孔聚乳酸,5 mm×5 mm×1 mm大小,孔隙率约90%,平均孔径约300μm。
由上海同济大学附属东方医院主办,上海胆道疾病会诊中心,上海市中西医结合协会外科专业委员会、《中华实验外科杂志》,《临床外科杂志》,上海市浦东新区医学会,上海市浦东新区胆胰疾病诊治协作组协办的“第一届胆道外科焦点问题的争论和探讨暨首届东方国际胆胰疾病论坛会议”将于2011年9月15~19日在上海举行。大会以胆道外科疾病和胰腺疾病为主题,
脊柱内固定的生物力学测试往往借助不同的脊柱不稳标本实现[1-5],实际应用时研究者的重点往往集中在内固定器械本身,而很少关注不同的模型对器械稳定性测试结果的影响.不同的脊柱不稳模型对内固定稳定性测试是否会产生不同的结果?为此我们通过采用不同的脊柱不稳模型,结合相同的内固定器进行测试并进行相互间的比较,以探讨不同的不稳模型是否会对结果产生不同的影响。