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二酰基甘油转移酶对三角褐指藻油脂积累及相关环境因子响应的研究

来源 :四川大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sws1274

【摘 要】

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本文应用RT—PCR和RACE方法扩增出三角褐指藻二酰基甘油转移酶（Ptdgat）全长cDNA，其完整编码框（ORF）为1587bp，编码528个氨基酸．基于克隆所得Ptdgat的ORF构建了反向互补RNA干扰载体，并

【作 者】

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涂丽 于广欣 陈波 曲芳兵 冷鹂 兰利琼 卿人韦 

【机 构】

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四川大学生命科学学院,中海油新能源投资有限责任公司

【出 处】

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四川大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2012年4期

【关键词】

：

三角褐指藻 二酰基甘油转移酶 RNAI 油脂积累 生物柴油 Phaeodactylum tricornutum  Diacylglycerol acyltran 

【基金项目】

：

国家高技术发展计划（863计划）（2007AA092427,2008AA102409）,国家自然科学基金面上项目（40976092）,横向项目（2010H0311）,中央高校项目（2010SCU22006）

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本文应用RT—PCR和RACE方法扩增出三角褐指藻二酰基甘油转移酶（Ptdgat）全长cDNA，其完整编码框（ORF）为1587bp，编码528个氨基酸．基于克隆所得Ptdgat的ORF构建了反向互补RNA干扰载体，并用基因枪PDS—1000／He转化野生型三角褐指藻，筛选到了所需的阳性转基因藻．实时荧光定量PCR（qPCR）结果揭示：含PtdgatRNA干扰结构的转基因藻的二酰基甘油转移酶的表达水平比野生型三角褐指藻该酶的表达水平有显著降低；野生型藻和转基因藻的油脂含量定量分析结果揭示：含RNAi干扰结

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