【摘 要】
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目的 探讨大鼠脑出血微创后行神经干细胞移植对其神经功能恢复的影响.方法 (1)从新生24h内的Wistar乳鼠海马组织中分离出神经干细胞,利用无血清培养技术,在体外进行传代培养
【机 构】
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佳木斯大学附属第一医院,黑龙江佳木斯,154002
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目的 探讨大鼠脑出血微创后行神经干细胞移植对其神经功能恢复的影响.方法 (1)从新生24h内的Wistar乳鼠海马组织中分离出神经干细胞,利用无血清培养技术,在体外进行传代培养、标记和鉴定.(2)采用未肝素化的心脏自体血制作大鼠尾状核脑出血模型.将模型分为正常对照组、脑出血自然恢复组、脑出血微创组、脑出血移植组、脑出血微创+移植组.(3)模型成功后24h行立体定向脑内血肿吸引清除术,出血后48h将体外扩增、纯化、并经BrdU标记的神经干细胞立体定向移植于血肿残腔内,不同时间点观察评估各组大鼠神经行为学改善情况.(4)通过免疫组化及荧光双标检测移植入血肿残腔的神经干细胞在脑出血周边组织中的增殖、分化情况.结果 (1)大鼠脑出血后神经功能评分,脑出血自然恢复组在术后21d与3d比较明显减低(P＜0.05),脑出血微创组、脑出血移植组及脑出血微创+移植组在术后14d、21d与3d比较明显减低(P＜0.05),脑出血微创组及脑出血移植组仅在术后21d时的评分明显低于脑出血自然恢复组(P＜0.05),而脑出血微创+移植组在术后14d时的评分即较脑出血自然恢复组明显减低(P＜0.05),其术后21d的评分也明显低于脑出血微创组和移植组(＜0.05),脑出血微创组与移植组各时间点的评分相比,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)大鼠脑出血周边组织中BrdU阳性细胞数在出血后7～ 14d明显增多,14d时达到高峰,21d时明显减少.除3d外,在7d、14d和21d的3个时间点,脑出血微创+移植组BrdU阳性及NSE/BrdU双标阳性细胞数均多于脑出血移植组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 从新生Wistar乳鼠海马组织中分离培养的是神经干细胞,并在体外能够长期培养和传代.大鼠脑出血微创后行神经干细胞移植能明显促进其神经功能的恢复.微创对神经干细胞在脑出血周边组织中的增殖、分化有促进作用.
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