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摘要：目的：探讨血液细胞分析仪应用于浆膜腔积液细胞计数中的方法与意义。
方法：对80例浆膜腔积液分别用血液细胞分析仪和显微镜计数法进行红细胞和白细胞的计数， 比较两法结果的一致性。
结果：对64份无异物标本，显微镜计数法算得白细胞计数为52—9700×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得白细胞计数为49—9819×106 /L，二者差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。而其余16份有异物的标本，两种方法的计数结果差异有显著性（P<0.05）。对52份非血性标本，显微镜计数法算得红细胞计数为43—33500×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得红细胞计数为399—35000×106 /L，二者差异显著，有统计学意义（P<0.01）。而其余28份血性标本，两种计数法测量的结果差异不大，不具统计学意义（P>0.05）。
结论：当浆膜腔积液细胞数目较多时， 可以用血液细胞分析仪做浆膜腔积液细胞计数检查，但无法完全取代传统的显微镜计数法。
关键词：浆膜腔积液细胞计数血液细胞分析仪
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）11-0533-01
浆膜腔积液检查是一个是重要的常规体液检测项目，而细胞计数是其一大重要组成部分。传统检查办法是在显微镜下对细胞进行技术，但其操作繁琐、灵敏度低、重复性差，若浆膜腔积液中白细胞含量较多或呈血性时，用显微镜计数就显得十分耗时。本文分别采用血液细胞分析仪以及显微镜对选取的80份浆膜腔积液标本进行细胞计数检查，探讨血液细胞分析在浆膜腔积液检查中的应用意义。
1一般资料
随机2012年1月—2012年12月在本院检验科进行浆膜腔积液检查的80名病人的积液标本，其中男54名，女26名，年龄范围19—68岁，平均年龄（39.2±6.8）岁。其中腹水积液标本48份，胸水积液标本32份。
2方法
2.1检查仪器与试剂。①血液细胞分析仪：型号为sysmex-xT-1800i，含相关配套试剂；②显微镜：型号为0L丫Mpus-cx31；③改良牛鲍氏细胞计数板；④EDTA- K2溶液：150g/ L。
2.2检查方法。在采集完浆膜腔积液后，及时取6mL用0.1mLEDTA—K2溶液对采集液进行抗凝处理，并尽快采用不同方法完成细胞计数。
2.3显微镜计数法。以《全国临床检验操作规程》（第2版）为操作指南，严格按照其标准进程规范操作。由两名经验丰富的检验人员用双盲法进行细胞计数，最后对结果取平均作为最终计数。
2.4血液细胞分析仪计数法。在使用仪器前，先确认仪器可以正常运行，对各个指标予以校准，设置空白背景值以及质控，并直接将标本涂片，在显微镜下观察标本中是否存在结晶、肿瘤细胞以及细胞碎片等异物。采用稀释法进行浆膜腔积液细胞计数，具体操作如下：根据Medonic CA620分析仪的操作指南进行外稀释，把浆膜腔积液当作末梢血，合理调整稀释倍数，令积液中红细胞和白细胞值均在仪器的现象范围内，然后根据此时的稀释倍数以及对于的测量值，换算出对应的细胞数量。每份标本都进行2两次计数测量，二者取平均记为最终计数。
2.5观察指标。观察计算各标本中的红细胞与白细胞数量。
2.6统计学方法。显微镜细胞计数红细胞数大于1010 /L 的标本标记为血性标本；所有数据经SPSS 13.0软件进行统计学分析与处理，P<0.05表示差异显著，有统计学意义。
3结果
3.1直接涂片后，在显微镜下未发现异物的浆膜腔积液标本共64份，红细胞计数小于1010 /L 的非血性标本共54份。
3.2两种方法对白细胞计数的结果比较。以显微镜下未发现异物的64份浆膜腔积液标本为检查对象，显微镜计数法算得白细胞计数为52—9700×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得白细胞计数为49—9819×106 /L，二者差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。而其余16份有异物的标本中，8份显示有肿瘤细胞，5份显示有细胞碎片，3份显示有胆固醇，两种方法的计数结果差异有显著性（P<0.05）。
3.3两种方法对红细胞计数结果的比较。以显微镜下细胞计数红细胞数小于1010 /L的52份非血性标本为检查对象，显微镜计数法算得红细胞计数为43—33500×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得红细胞计数为399—35000×106 /L，二者差异显著，有统计学意义（P<0.01）。而其余28份血性标本，两种计数法测量的结果差异不大，不具统计学意义（P>0.05）。
4讨论
依据本文研究结果不难看出，当标本中没有异物时，显微镜计数法与血液细胞分析仪计数法在计算白细胞数目方面差异较小（P>0.05）；有异物时，两种计数法的一致性很差，差异有统计学意义（P<0.05）；而对于红细胞而言，浆膜腔积液标本为非血性标本时，两种方法的计数结果差异性较大，差异有统计学意义（P<0.05），而当其为血性标本时，两种计数法的一致性很好，结果无明显差异（P>0.05）。我们使用血液细胞分析仪对标本进行细胞计数前，需先直接涂片并置于显微镜下观察，确认标本中没有异物时，才可以用血液细胞分析仪来进行白细胞计数；相应的，只有当标本是血性标本时，红细胞计数才可以以仪器计数法来测量。
分析其原因，可能是当积液中有异物时，仪器无法正确识别出异物以及异常细胞，从而引起计数偏差，而导致两法对非血性标本红细胞计数结果差异较大的原因则可能与Medonic CA620分析仪的精度以及无法识别因渗透压变化引起的红细胞形态变化有关。
总之，当浆膜腔积液细胞数目较多时， 可以用血液细胞分析仪做浆膜腔积液细胞计数检查，但无法完全取代传统的显微镜计数法。
参考文献
[1]孟冬娅，牛景阳，徐亮.血细胞分析仪白细胞5分类法原理[J].沈阳部队医药，2010，23（4）：277-279
[2]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006：132-135
[3]朱丽丹，陈小剑，干素娥.血细胞分析仪检测浆膜腔积液细胞数的初探[J].江西医学检验，2011，22（22）：131
方法：对80例浆膜腔积液分别用血液细胞分析仪和显微镜计数法进行红细胞和白细胞的计数， 比较两法结果的一致性。
结果：对64份无异物标本，显微镜计数法算得白细胞计数为52—9700×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得白细胞计数为49—9819×106 /L，二者差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。而其余16份有异物的标本，两种方法的计数结果差异有显著性（P<0.05）。对52份非血性标本，显微镜计数法算得红细胞计数为43—33500×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得红细胞计数为399—35000×106 /L，二者差异显著，有统计学意义（P<0.01）。而其余28份血性标本，两种计数法测量的结果差异不大，不具统计学意义（P>0.05）。
结论：当浆膜腔积液细胞数目较多时， 可以用血液细胞分析仪做浆膜腔积液细胞计数检查，但无法完全取代传统的显微镜计数法。
关键词：浆膜腔积液细胞计数血液细胞分析仪
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）11-0533-01
浆膜腔积液检查是一个是重要的常规体液检测项目，而细胞计数是其一大重要组成部分。传统检查办法是在显微镜下对细胞进行技术，但其操作繁琐、灵敏度低、重复性差，若浆膜腔积液中白细胞含量较多或呈血性时，用显微镜计数就显得十分耗时。本文分别采用血液细胞分析仪以及显微镜对选取的80份浆膜腔积液标本进行细胞计数检查，探讨血液细胞分析在浆膜腔积液检查中的应用意义。
1一般资料
随机2012年1月—2012年12月在本院检验科进行浆膜腔积液检查的80名病人的积液标本，其中男54名，女26名，年龄范围19—68岁，平均年龄（39.2±6.8）岁。其中腹水积液标本48份，胸水积液标本32份。
2方法
2.1检查仪器与试剂。①血液细胞分析仪：型号为sysmex-xT-1800i，含相关配套试剂；②显微镜：型号为0L丫Mpus-cx31；③改良牛鲍氏细胞计数板；④EDTA- K2溶液：150g/ L。
2.2检查方法。在采集完浆膜腔积液后，及时取6mL用0.1mLEDTA—K2溶液对采集液进行抗凝处理，并尽快采用不同方法完成细胞计数。
2.3显微镜计数法。以《全国临床检验操作规程》（第2版）为操作指南，严格按照其标准进程规范操作。由两名经验丰富的检验人员用双盲法进行细胞计数，最后对结果取平均作为最终计数。
2.4血液细胞分析仪计数法。在使用仪器前，先确认仪器可以正常运行，对各个指标予以校准，设置空白背景值以及质控，并直接将标本涂片，在显微镜下观察标本中是否存在结晶、肿瘤细胞以及细胞碎片等异物。采用稀释法进行浆膜腔积液细胞计数，具体操作如下：根据Medonic CA620分析仪的操作指南进行外稀释，把浆膜腔积液当作末梢血，合理调整稀释倍数，令积液中红细胞和白细胞值均在仪器的现象范围内，然后根据此时的稀释倍数以及对于的测量值，换算出对应的细胞数量。每份标本都进行2两次计数测量，二者取平均记为最终计数。
2.5观察指标。观察计算各标本中的红细胞与白细胞数量。
2.6统计学方法。显微镜细胞计数红细胞数大于1010 /L 的标本标记为血性标本；所有数据经SPSS 13.0软件进行统计学分析与处理，P<0.05表示差异显著，有统计学意义。
3结果
3.1直接涂片后，在显微镜下未发现异物的浆膜腔积液标本共64份，红细胞计数小于1010 /L 的非血性标本共54份。
3.2两种方法对白细胞计数的结果比较。以显微镜下未发现异物的64份浆膜腔积液标本为检查对象，显微镜计数法算得白细胞计数为52—9700×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得白细胞计数为49—9819×106 /L，二者差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。而其余16份有异物的标本中，8份显示有肿瘤细胞，5份显示有细胞碎片，3份显示有胆固醇，两种方法的计数结果差异有显著性（P<0.05）。
3.3两种方法对红细胞计数结果的比较。以显微镜下细胞计数红细胞数小于1010 /L的52份非血性标本为检查对象，显微镜计数法算得红细胞计数为43—33500×106 /L，血液细胞分析仪计数法算得红细胞计数为399—35000×106 /L，二者差异显著，有统计学意义（P<0.01）。而其余28份血性标本，两种计数法测量的结果差异不大，不具统计学意义（P>0.05）。
4讨论
依据本文研究结果不难看出，当标本中没有异物时，显微镜计数法与血液细胞分析仪计数法在计算白细胞数目方面差异较小（P>0.05）；有异物时，两种计数法的一致性很差，差异有统计学意义（P<0.05）；而对于红细胞而言，浆膜腔积液标本为非血性标本时，两种方法的计数结果差异性较大，差异有统计学意义（P<0.05），而当其为血性标本时，两种计数法的一致性很好，结果无明显差异（P>0.05）。我们使用血液细胞分析仪对标本进行细胞计数前，需先直接涂片并置于显微镜下观察，确认标本中没有异物时，才可以用血液细胞分析仪来进行白细胞计数；相应的，只有当标本是血性标本时，红细胞计数才可以以仪器计数法来测量。
分析其原因，可能是当积液中有异物时，仪器无法正确识别出异物以及异常细胞，从而引起计数偏差，而导致两法对非血性标本红细胞计数结果差异较大的原因则可能与Medonic CA620分析仪的精度以及无法识别因渗透压变化引起的红细胞形态变化有关。
总之，当浆膜腔积液细胞数目较多时， 可以用血液细胞分析仪做浆膜腔积液细胞计数检查，但无法完全取代传统的显微镜计数法。
参考文献
[1]孟冬娅，牛景阳，徐亮.血细胞分析仪白细胞5分类法原理[J].沈阳部队医药，2010，23（4）：277-279
[2]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006：132-135
[3]朱丽丹，陈小剑，干素娥.血细胞分析仪检测浆膜腔积液细胞数的初探[J].江西医学检验，2011，22（22）：131