LY294002和雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的HeLa细胞Caspase-3/9蛋白表达的调控作用

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目的:研究哺乳类雷帕霉素靶蛋白抑制剂雷帕霉素(Rap)和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002(LY)对CVB3诱导的HeLa细胞凋亡后Caspase家族促凋亡因子Caspase-3/9蛋白表达的调控,探讨mTOR信号通路在CVB3诱导细胞凋亡中的作用.方法:通过CVB3感染HeLa细胞建立病毒性心肌炎模型,使用10 nmo l/L的雷帕霉素和25μmol/L的LY294002干预CVB3感染的HeLa细胞,采用Western检测Caspase-3/9的蛋白表达.结果:与对照组比较,在CVB3感染后Caspase-3在Rap及LY组均有不同程度表达增强,同时在CVB3感染后12 h Cleaved Caspase-3表达量最高.两组中Caspase-9表达在CVB3感染后12h、24h增高,而Cleaved Caspase-9表达在LY组中于CVB3感染后3 h开始出现,到感染后12 h为表达高峰,继而开始下降;在Rap组中CVB3感染6和12 h后Cleaved Caspase-9蛋白表达量降低,感染24 h后表达增高.结论:雷帕霉素和LY294002促进CVB3诱导的Caspase-9蛋白活化,同时促进Caspase-3的自我裂解,以启动Caspase级联反应,促进细胞凋亡.
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