【摘 要】
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目的通过对斑马鱼受精卵进行显微注射启动铁调素蛋白表达的mRNA(信使核糖核酸)，使其铁调素基因过表达，观察铁调素过表达后对斑马鱼的骨代谢的影响，探讨铁调素过表达对于骨代谢影响的机制。方法以受精后0.5 h斑马鱼的受精卵为模型，予以铁调素的mRNA显微注射受精卵，将注射后的幼鱼于第4天进行提取蛋白，进行Western blot法鉴定后，对注射铁调素的mRNA后的幼鱼于第4天进行铁染色，与野生型比较观
【机 构】
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214002 无锡，南京医科大学附属无锡市第二人民医院骨科,214002 无锡，南京医科大学附属无锡市第二人民医院骨科,215004 苏州大学附属第二医院骨科,214002 无锡，南京医科大学附属无锡
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目的通过对斑马鱼受精卵进行显微注射启动铁调素蛋白表达的mRNA(信使核糖核酸)，使其铁调素基因过表达，观察铁调素过表达后对斑马鱼的骨代谢的影响，探讨铁调素过表达对于骨代谢影响的机制。
方法以受精后0.5 h斑马鱼的受精卵为模型，予以铁调素的mRNA显微注射受精卵，将注射后的幼鱼于第4天进行提取蛋白，进行Western blot法鉴定后，对注射铁调素的mRNA后的幼鱼于第4天进行铁染色，与野生型比较观察铁含量变化，对注射铁调素的mRNA后的幼鱼于第4天分别进行茜素红染色，与野生型比较硬骨的形态差异；对注射铁调素的mRNA后的幼鱼于第4天提取的cDNA采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测相关成骨代谢的基因表达，比较和野生型基因组的成骨下游基因的差异。
结果对注射铁调素的mRNA后第4天斑马鱼进行铁染色，与野生型染色比较色素沉着明显变浅，对铁调素的mRNA后第4天斑马鱼进行茜素红与野生型染色比较，硬骨茜素红染色变浅且肋骨及尾鳍未发育，注射铁调素的mRNA后第4天的斑马鱼做定量FQ-PCR进行检测相关成骨代谢的基因表达量与野生型斑马鱼成骨基因表达比较均下调，尤其以Runx2a和Runx2b最为显著，野生型分别为1.069±0.023和1.023±0.021降至处理后的0.256±0.016和0.422±0.078(P＝0.000)。
结论过表达斑马鱼的铁调素造成斑马鱼体内铁缺少，使得斑马鱼的成骨基因降低，造成骨发育迟缓，骨量减低。
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