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【摘要】目的 探讨纤维蛋白原对交叉配血试验的干扰原因及其去除方法。方法：对交叉配血标本进行细玻璃棒碾压及恒温孵育等，然后进行交叉配血试验，对试验结果中因纤维蛋白原干扰可能性较大的标本进行分析及探讨其去除方法。结果 对标本及结果分析表明，纤维蛋白原对交叉配血试验结果有影响，试验方法基本可以去除纤维蛋白原，从而提高试验结果的准确性。结论 血浆或一些抗凝标本中存在的纤维蛋白原其对交叉配血试验结果有不同程度影响，因而建议输血科多采用血清进行试验或者通过上述方法将其去除后再行交叉配血试验。
【关键词】交叉配血实验；纤维蛋白原；干扰原因；去除方法
交叉配血试验是患者输血前的必要步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体，其主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应[1]。目前主要的试验方法包括盐水介质配血、抗球蛋白介质配血及聚凝胺介质配血等，试验结果以红细胞凝集或溶血等表现出现，但若标本中存在较多纤维蛋白原时，试验过程中就会发生凝固现象，此时对试验结果很难判断，因此，减少纤维蛋白原对交叉配血试验的影响至关重要。本文通过对其干扰原因及去除方法进行分析，现汇报如下。
1 材料和方法
1.1 标本及试验材料：选取标本为交叉配血试验中出现的28例纤维蛋白原干扰可能性较大的标本，均为受血者和供血者(各40例) 抽取的静脉血2~3ml。准备好交叉配血试验材料，包括生理盐水、25mmol/L的CaCl2溶液、50g/L的葡萄糖溶液(含EDTA-Na)、枸橼酸钠溶液、凝聚胺试剂盒、小试管、滴管、试管架、记号笔、显微镜、离心机及去除纤维蛋白原用的细玻璃棒等。
1.2 试验方法 本研究交叉配血试验时采用盐水介质交叉和凝聚胺配血方法，去除纤维蛋白原干扰则采用细玻璃棒碾压及恒温孵育(即水浴离心取血清)的方法。
1.2.1盐水介质交叉配血法：严格按照操作获取受血者和供血者血液、分离后血清及制作而成的红细胞悬液(5%生理盐水)，然后分别进行主侧和次侧试验，受血者血清加供血者红细胞悬液各一滴为主侧，受血者红细胞悬液加供血者血清各一滴为次侧，将主次侧试管混匀离心后观察结果。主侧配血结果要求是绝对不可以有凝集或溶血现象，次测配血要求是供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。因此，若主次侧均不凝集，则表示血型相同，可以输血；若主侧无凝集，次侧凝集且较弱(效价<1：200)，无溶血，则为异型配血，只能输少量血液，且输血速度不能太快，并且需要在输血过程中密切观察患者情况；无论何种原因导致主侧出现凝集，则绝对不可输血
1.2.2凝聚胺配血法：取两支分别标明主侧次侧的试管，并在主侧管供血者3～5％1滴悬红中加入2滴受血者血清，在次侧管受血者1滴悬红中加入供血者2滴血清，然后离心15秒,观察是否凝集，再各加LIM溶液0.65ml，混匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混匀后3000r/min离心15秒，把上清液倒掉，让管底残留约0.1ml液体，轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做，最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混匀1min内观察结果，看凝集是否散开。其结果判断方法同盐水介质交叉配血法；1.2.3去除纤维蛋白原干扰方法：将凝集块用细玻璃棒碾压后放至显微镜下观察，若红细胞为分散状态且形态有变化，那么此凝集为假阳性。在一些抗凝标本中加入CaCl2溶液数滴，放至37℃水浴中几分钟后离心并将血清进行盐水介质交叉配血试验，观察其结果。
2 结果
28例纤维蛋白原干扰可能性较大的标本经过碾压后发现，21例标本均出现红细胞分散及形状变化，7例标本经过水浴离心后再进行交叉配血试验后无红细胞凝集，表明此28例标本为假凝集，是假阳性，其配血试验中的凝集现象是由于存在过多纤维蛋白原引起。
3 讨论
ABO血型鉴定及交叉配血试验是所有患者输血前必须严格完成的环节，交叉配血试验主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应[2]。纤维蛋白原存在于血浆中，且在交叉配血试验时，当其被激活就会发生凝集，凝集时将红细胞夹带于其凝集块中，引起红细胞凝集，所以造成交叉配血试验假阳性的标本多由于纤维蛋白原过多引起，特别是试验过程中使用了血浆配血，临床上经常出现血浆配血，其原因主要包括：①由于在许多的试剂盒如凝集胺试剂，这些试剂的说明书中没有表示必须用血清进行交叉配血试验，而是说可使用血清或血浆，故大部分操作人员不会太在意使用血浆带来的误差；②与患者血液进行配血的标本大多保留于血袋中的，而血袋中多加入抗凝剂，因而纤维蛋白原的大量存在对试验结果存在影响[3-4] 。 本文研究了28例红细胞凝集的可疑标本，将其进行盐水介质交叉配血试验出现凝集后结果表明：21例标本均出现红细胞分散及形状变化，7例标本经过水浴离心后再进行交叉配血试验后无红细胞凝集，表明此28例标本为假凝集，是假阳性，其配血试验中的凝集现象是由于存在过多纤维蛋白原引起。总之，纤维蛋白原的存在对交叉配血试验结果存在不同程度影响，因而为了减少纤维蛋白原的干扰，建议临床上多采用血清来进行交叉配血试验。但是这种要求很难达到，需要受血者的血标本不能加抗凝剂，且血库中与受血标本进行配血试验的血袋标本应也不能加抗凝剂。因此，笔者认为满足以上条件很难，对于临床上试验结果怀疑被纤维蛋白原干扰的标本可进行细玻璃棒碾压法或水浴离心取血清的方法对结果进行鉴别。
参考文献
[1]武建.凝聚胺法交叉配血的干扰及影响[J].临床血液学杂志,2008,21 (2):98-99.
[2]赵继梅.浅谈交叉配血试验[J].中国社区医师:医学专业,2010,13(6): 170.
[3] Arslan O. Electronic crossmat ching [J] .T ransfus MedRev,2006,20(1):75-79.
[4]陈活强,容伯芬,蔡葵.两种交叉配血方法的比较研究[J].广州医药,2010,41(5):53-54.
【关键词】交叉配血实验；纤维蛋白原；干扰原因；去除方法
交叉配血试验是患者输血前的必要步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体，其主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应[1]。目前主要的试验方法包括盐水介质配血、抗球蛋白介质配血及聚凝胺介质配血等，试验结果以红细胞凝集或溶血等表现出现，但若标本中存在较多纤维蛋白原时，试验过程中就会发生凝固现象，此时对试验结果很难判断，因此，减少纤维蛋白原对交叉配血试验的影响至关重要。本文通过对其干扰原因及去除方法进行分析，现汇报如下。
1 材料和方法
1.1 标本及试验材料：选取标本为交叉配血试验中出现的28例纤维蛋白原干扰可能性较大的标本，均为受血者和供血者(各40例) 抽取的静脉血2~3ml。准备好交叉配血试验材料，包括生理盐水、25mmol/L的CaCl2溶液、50g/L的葡萄糖溶液(含EDTA-Na)、枸橼酸钠溶液、凝聚胺试剂盒、小试管、滴管、试管架、记号笔、显微镜、离心机及去除纤维蛋白原用的细玻璃棒等。
1.2 试验方法 本研究交叉配血试验时采用盐水介质交叉和凝聚胺配血方法，去除纤维蛋白原干扰则采用细玻璃棒碾压及恒温孵育(即水浴离心取血清)的方法。
1.2.1盐水介质交叉配血法：严格按照操作获取受血者和供血者血液、分离后血清及制作而成的红细胞悬液(5%生理盐水)，然后分别进行主侧和次侧试验，受血者血清加供血者红细胞悬液各一滴为主侧，受血者红细胞悬液加供血者血清各一滴为次侧，将主次侧试管混匀离心后观察结果。主侧配血结果要求是绝对不可以有凝集或溶血现象，次测配血要求是供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。因此，若主次侧均不凝集，则表示血型相同，可以输血；若主侧无凝集，次侧凝集且较弱(效价<1：200)，无溶血，则为异型配血，只能输少量血液，且输血速度不能太快，并且需要在输血过程中密切观察患者情况；无论何种原因导致主侧出现凝集，则绝对不可输血
1.2.2凝聚胺配血法：取两支分别标明主侧次侧的试管，并在主侧管供血者3～5％1滴悬红中加入2滴受血者血清，在次侧管受血者1滴悬红中加入供血者2滴血清，然后离心15秒,观察是否凝集，再各加LIM溶液0.65ml，混匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混匀后3000r/min离心15秒，把上清液倒掉，让管底残留约0.1ml液体，轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做，最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混匀1min内观察结果，看凝集是否散开。其结果判断方法同盐水介质交叉配血法；1.2.3去除纤维蛋白原干扰方法：将凝集块用细玻璃棒碾压后放至显微镜下观察，若红细胞为分散状态且形态有变化，那么此凝集为假阳性。在一些抗凝标本中加入CaCl2溶液数滴，放至37℃水浴中几分钟后离心并将血清进行盐水介质交叉配血试验，观察其结果。
2 结果
28例纤维蛋白原干扰可能性较大的标本经过碾压后发现，21例标本均出现红细胞分散及形状变化，7例标本经过水浴离心后再进行交叉配血试验后无红细胞凝集，表明此28例标本为假凝集，是假阳性，其配血试验中的凝集现象是由于存在过多纤维蛋白原引起。
3 讨论
ABO血型鉴定及交叉配血试验是所有患者输血前必须严格完成的环节，交叉配血试验主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应[2]。纤维蛋白原存在于血浆中，且在交叉配血试验时，当其被激活就会发生凝集，凝集时将红细胞夹带于其凝集块中，引起红细胞凝集，所以造成交叉配血试验假阳性的标本多由于纤维蛋白原过多引起，特别是试验过程中使用了血浆配血，临床上经常出现血浆配血，其原因主要包括：①由于在许多的试剂盒如凝集胺试剂，这些试剂的说明书中没有表示必须用血清进行交叉配血试验，而是说可使用血清或血浆，故大部分操作人员不会太在意使用血浆带来的误差；②与患者血液进行配血的标本大多保留于血袋中的，而血袋中多加入抗凝剂，因而纤维蛋白原的大量存在对试验结果存在影响[3-4] 。 本文研究了28例红细胞凝集的可疑标本，将其进行盐水介质交叉配血试验出现凝集后结果表明：21例标本均出现红细胞分散及形状变化，7例标本经过水浴离心后再进行交叉配血试验后无红细胞凝集，表明此28例标本为假凝集，是假阳性，其配血试验中的凝集现象是由于存在过多纤维蛋白原引起。总之，纤维蛋白原的存在对交叉配血试验结果存在不同程度影响，因而为了减少纤维蛋白原的干扰，建议临床上多采用血清来进行交叉配血试验。但是这种要求很难达到，需要受血者的血标本不能加抗凝剂，且血库中与受血标本进行配血试验的血袋标本应也不能加抗凝剂。因此，笔者认为满足以上条件很难，对于临床上试验结果怀疑被纤维蛋白原干扰的标本可进行细玻璃棒碾压法或水浴离心取血清的方法对结果进行鉴别。
参考文献
[1]武建.凝聚胺法交叉配血的干扰及影响[J].临床血液学杂志,2008,21 (2):98-99.
[2]赵继梅.浅谈交叉配血试验[J].中国社区医师:医学专业,2010,13(6): 170.
[3] Arslan O. Electronic crossmat ching [J] .T ransfus MedRev,2006,20(1):75-79.
[4]陈活强,容伯芬,蔡葵.两种交叉配血方法的比较研究[J].广州医药,2010,41(5):53-54.