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目的 制备具有我国食源性特点的6种克罗诺杆菌检验用标准物质.方法 通过生化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及二代高通量全基因组测序技术对研究用菌株进行菌种鉴定确认后,制备104 CFU/样品浓度的标准物质.参照CNAS—GL003:2008《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》等标准要求对样品进行均匀性检验后,采用单因素方差分析对结果进行评价.将样品放于-20、4、25和37℃条件下,分别进行运输稳定性检验及储存稳定性检验.依据GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》,将研制的6种标准物质分别加入20件乳粉样品中进行检验,检测真实食品样品中适用性.结果 6株菌株生化鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌属(Cronobacter sakazakii),准确度为92％～99％;MALDI-TOF MS鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii),分数为1.914～2.244;全基因组测序鉴定结果与菌株已知种或亚种信息一致.6种标准物质F值分别为0.422、0.922、0.980、0.409、0.721及0.631,F
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以缺铁的铁蛋白和橙皮素为原料,在pH 9条件下制备铁蛋白-橙皮素共价复合物,探讨共价结合对蛋白结构和理化性质的影响。结果表明,橙皮素与铁蛋白的共价作用降低了铁蛋白的荧光强度并产生红移现象,改变了铁蛋白的结构。铁蛋白-橙皮素共价复合物的溶解度改变,等电点降低,其铁氧化沉淀活性提高,铁的还原释放活性降低。同时,共价复合物的热稳定性增强。铁蛋白-橙皮素复合物的形成赋予了铁蛋白新的功能特性,对探究食品组分相互作用,开发基于铁蛋白的相关食品或药品具有一定的理论指导。
维生素MK-4在食品、保健和制药工业中被广泛用于膳食补充剂和药物治疗。为了获得1株四烯甲萘醌MK-4的高产菌株,对细胞膜的稳态进行了系统的分析和优化。首先,对出发菌株Bacillus subtilis BC04细胞膜的完整性相关的基因进行整合分析,发现膜蛋白相关基因srfAD对MK-4的积累有重要的影响;然后对流动性、渗透性相关基因进行整合分析,找到了影响MK-4积累的基因ypkP和fadR。通过组合优化,确定优势菌株为BF14,其整合了基因srfAD、ypkP,敲除了基因fadR。BF14在40℃条件下
以往河道整治工程后评价往往采用比较分析法等定性方法,文章首次在河道整治工程中采用模糊层次分析法(FAHP)对工程效果进行量化评价,更为直观评价工程实施效果,实践结果表明该方法的尝试取得了良好效果,工程实施基本成功.
目的 研制均一性和稳定性符合能力验证要求的沙门氏菌能力验证样品,并应用于乳粉中沙门氏菌检测的能力验证.方法 选取本实验室保存的ATCC、CMCC标准菌株及食品中分离菌株作为能力验证样品的菌株来源,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和全自动微生物分析系统进行种属确认,并对沙门氏菌标准菌株进行血清学分型;采用冷冻干燥技术制备沙门氏菌能力验证样品,取阴性、阳性各20个能力验证样品添加灭菌乳粉基质后按照国标方法进行均匀性检验,并参照CNAS—GL003:2018《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,采用最大可
目的 对分离自母乳、婴儿肠道的植物乳杆菌进行全基因组测序,分析菌株间亲缘关系和细菌素合成相关基因.方法 采用Illumina高通量测序平台对不同来源的植物乳杆菌进行全基因组测序,质控过滤后的数据经Unicycler组装获得基因组精细图,通过比对COG、CAZy数据库对功能基因进注释,并借助BAGEL4等生物信息学分析工具鉴别植物乳杆菌素合成相关的基因簇,分析不同来源植物乳杆菌的益生潜力.结果 5株植物乳杆菌基因组平均鸟嘌呤和胞嘧啶(guanine and cytosine,GC)含量为44％,母乳源植物乳
食源性人兽共患病是指摄入被人与脊椎动物共同病原微生物污染的食物后,在人与脊椎动物之间相互传播的疾病.随着饮食习惯及畜牧业的发展,食源性人兽共患病对食品安全、人类公共卫生安全及畜牧业的持续发展发起了更加严峻的挑战.近几年全球范围内食源性人兽共患病的传播,正是由人类的不良饮食习惯、对人与自然和谐共处意识的缺乏、对公共卫生风险防控能力的不足所导致的.因此,了解目前对食源性人兽共患病的防治措施及防控检测手段,进一步开发拓展对食源性人兽共患病病原安全有效、快速、经济的检测方法是十分必要的.本文综述了近年以细菌、病毒
目的 评定高效液相色谱法测定鸡蛋中角黄素含量的不确定度.方法 样品经乙腈水浴超声提取和离心,取上清液用正己烷脱脂,再用旋转蒸发仪浓缩后,乙腈定容,经C18色谱柱分离,流动相等度洗脱,采用高效液相色谱仪(紫外-可见检测器)在波长471 nm进行测定.外标法定量测定鸡蛋中角黄素含量.依据JJF 1135—2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,考察整个测量过程不确定度来源(如称重、试样定容体积、标准溶液配制、标准曲线拟合、样品重复性和回收率);并对各个因
目的 制备均匀性和稳定性符合要求的大肠杆菌噬菌体MS2标准物质,用于诺如病毒检验过程质量控制.方法 对大肠杆菌噬菌体MS2(CMCCPh001)进行分子生物学确认.采用冷冻干燥技术制成微球状标准物质,并进行均匀性、长期稳定性、短期稳定性检验.以牡蛎等5种样品作为基质,对使用效果进行确认.结果 制备的样品呈球形、白色、大小均一,其均匀性符合要求,经-20℃12个月长期储存,样品稳定,经4℃28 d以及37℃5 d的短期储存,样品稳定.阈值循环数(threshold cycle,Cq)值与均匀性检平均值差异不
目的 通过调整建库过程中的测序接头加入量、片段选择的执行与否、文库扩增循环数等条件,建立一种基于Illumina测序平台的高效稳定的痕量样本高通量文库构建方法.方法 采用不同类型的样本,设计不同起始DNA量(最低至0.1 ng)的文库构建策略,主要对接头使用量、扩增循环数等进行优化,并通过数据分析评估文库质量.结果 对于起始量低至0.1 ng的DNA样本,基因组文库构建成功率达100％.对于基因组较小的细菌,0.1 ng的起始DNA量的数据组装效果与100 ng起始DNA量相近;对于基因组较大、结构复杂的
目的 建立蛋白酶K结合磁珠免疫沉淀提取贝类中甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)的方法,并与国际标准方法(ISO15216—2017)进行比较研究.方法 应用高效价的HAV单克隆抗体,采用偶联技术,通过优化参数,建立蛋白酶K结合磁珠免疫沉淀的提取方法;通过人工预加入103～105 CCID50/mL的4种甲型肝炎活病毒,计算回收率和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD),评价方法的提取效果;通过对来自5个产地的4种贝类进行病毒提取和一步法实时荧