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目的
应用RNA干扰技术抑制瞬时受体电位通道(TRPC1)基因的表达,观察TRPC1对肺腺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响。
方法将经化学修饰的TRPC1特异性小干扰性RNA(siRNA)转染A549细胞,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞TRPC1 mRNA和蛋白表达水平。通过MTT、细胞周期检测和侵袭实验,观察A549细胞恶性生物学行为的改变。
结果靶向TRPC1基因的siRNA明显抑制了目的基因的表达。体外实验表明,靶向TRPC1基因的siRNA转染A459细胞后,细胞增殖抑制率达34.7%,而非特异性siRNA未能影响细胞增殖。细胞周期检测结果显示靶向TRPC1基因的siRNA导致了细胞周期G0/G1期阻滞(转染NC-siRNA 48 h后,A549细胞处于G0/G1期的细胞比例为54.7%±5.8%,而转染TRPC1-siRNA的细胞处于G0/G1期的细胞比例为71.0%±7.0%,P<0.05)。同时,当TRPC1基因表达被抑制时,A459细胞侵袭能力明显下降(P<0.05)。
结论抑制TRPC1基因的表达可显著抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力。