观察MTB感染豚鼠接种重组结核疫苗AEC/BC02(由抗原Ag85b、ESAT6–CFP10和复合佐剂BC02构成,简称AEC/BC02)后是否诱发超敏反应(Koch现象)。
方法18只豚鼠(雌雄各半)皮下注射MTB,5.0×103 CFU/只。40 d后平均分成3组,每组6只:(1)生理盐水组:注射生理盐水0.5 ml/只;(2)AEC/BC02组:注射1人份剂量/只,即(10 μg Ag85b+10 μg ESAT6–CFP10)/0.5 ml BC02/只;(3)H37Ra组:注射H37Ra灭活全菌体1 mg/只。3组均每2天注射1针,共3针。首次免疫3周后解剖豚鼠观察肝、脾、肺脏器病变,进行脾和肺组织活菌计数;肺组织切片染色后用Image–Pro Plus软件分析其炎症反应程度。
结果H37Ra组肝、脾、肺综合病变评分为(48±26)分,低于生理盐水的(62±15)分,差异无统计学意义(t=1.093,P=0.300)。AEC/BC02组综合病变评分为(36±15)分,低于生理盐水组,差异有统计学意义(t=2.980,P=0.014),但与H37Ra组比较差异无统计学意义(t=1.009,P=0.337)。H37Ra组脾活菌数为(5.31±0.80) log10 CFU,低于生理盐水组的(5.57±0.75) log10 CFU,差异无统计学意义(t=1.581,P=0.574)。AEC/BC02组脾活菌数为(4.64±0.64) log10 CFU,低于生理盐水组,差异有统计学意义(t=2.306,P=0.044),但与H37Ra组比较,差异无统计学意义(t=1.602,P=0.140)。AEC/BC02组和H37Ra组肺活菌数分别为(3.71±1.01)和(3.82±1.25) log10 CFU,与生理盐水组的(4.15±0.69)log10 CFU比较,差异均无统计学意义(t=0.881,P=0.399;t=0.566,P=0.584)。H37Ra组的肺部炎症区域面积较大,占(33.0±4.4)%,高于生理盐水组的(14.8±8.4)%(t=4.719,P=0.001)和AEC/BC02的(19.7±7.9)%(t=3.616,P=0.005),而AEC/BC02组与生理盐水组比较差异无统计学意义(t=1.041,P=0.322)。
结论肺部炎症反应提示感染MTB的豚鼠接种H37Ra灭活全菌体后可产生较为明显的Koch反应,而重组AEC/BC02疫苗诱发Koch现象的风险较低。