【摘 要】
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目的 建立新生大鼠前扣带皮层(ACC)神经元的体外培养方法,并进行纯度和生长状态检测.方法 从新生鼠ACC分离出神经元,采用低浓度胰酶长时间消化、阿糖胞苷处理、差速培养等方
【机 构】
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山东大学附属省立医院麻醉科,济南,25002l;泰安市中心医院肾内科,山东,泰安,271000
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目的 建立新生大鼠前扣带皮层(ACC)神经元的体外培养方法,并进行纯度和生长状态检测.方法 从新生鼠ACC分离出神经元,采用低浓度胰酶长时间消化、阿糖胞苷处理、差速培养等方法进行体外原代培养.在培养的第7天,应用兔抗大鼠微管相关蛋白2(MAP2)对培养的神经元进行纯度鉴定,利用微量滴定(MTT)法测定培养第7-12天ACC神经元的生长状态.结果 从新生大鼠ACC分离的神经元,培养至第5天,可见多数细胞长出2个以上突起且呈多极形态并交织成网;第7天神经元有多种形式的接触,互相迁移靠拢,部分神经元聚集成团.MAP2细胞免疫荧光染色结果表明,ACC神经元阳性率大于80%,MTT结果显示,培养第7-9天的ACC神经元可保持较好的生长状态,之后细胞活性降低.结论 新生大鼠ACC神经元可进行体外原代培养,纯度和活力检测表明,培养第7～9天的神经元可作为ACC神经元相关研究的体外细胞模型.
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