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摘 要：建立气相色谱法测定冠心苏合咀嚼片中冰片的含量。方法1：SE-54弹性石英毛细管柱（0.32mm×30mm，0.33μm）；载气：氮气；流速为2ml/min；汽化室温度180℃；检测器温度200℃；柱温100℃。进样量：1μl；定量方法：内标峰面积法。龙脑在0.5～8mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。龙脑平均回收率分别为99.5%。方法2：以聚乙二醇20000（PEG-20M）为固定相，涂布浓度10%；柱温140℃。进样量：1μl。龙脑在0.5～10mgomL-1范围内呈良好的线性关系。龙脑平均回收率分别为99.6%。结论：两种方法都可用于冰片的含量测定。
关键词：冠心苏合咀嚼片；含量；测定
冠心苏合咀嚼片为棕褐色片；气芳香，味苦、微甜，由苏合香、冰片、檀香、乳香（制）、青木香等组成。冠心苏合咀嚼片具有理气宽胸，止痛的功效。冠心苏合咀嚼片常用于心绞痛、胸闷憋气等。现代研究表明：冠冠心苏合咀嚼片对实验动物具有增加冠脉血流量；具有降低血压和减慢心率的作用。冰片别名为龙脑、龙脑香、脑子、冰片脑、梅花脑、片脑、老梅片、梅片等。冰片可用于用于闭证神昏、目赤肿痛、疮疡肿痛、溃后不敛等。《本草经疏》记载：“凡中风非外来之风邪，乃因气血虚而病者忌之；小儿吐泻后成惊者为慢脾风，切不可服，急惊属实热可用，慢惊属虚寒不可用；眼目昏暗属肝肾虚者不宜入点药。”龙脑为冰片主要考察指标，所以本实验采用气相色谱法对冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量进行测定。
1 仪器与试药
1.1仪器：GC900B高性能气相色谱仪（上海天普分析仪器有限公司）；KQ250DE超声波清洗器超声波检测仪器（烟台鑫康商贸有限公司）；CTLW-120实验室全自动洗瓶机（青岛永合创信电子科技有限公司）；H2050R台式高速冷冻离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；H.S11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；ELGA CENTRA 实验室中央供水系统（广州安一生物科技有限公司）；501静音无油空压机（上海苍茂实业有限公司）；PGN-3000北京谱莱析高纯氮气发生器（北京谱莱析科技有限公司）；RE-501旋转蒸发仪（深圳市朗诚实业有限公司）；AHS-6890自动顶空进样器（北京华仪三谱仪器有限责任公司）；AE224全触屏电子天平（海舜宇恒平科学仪器有限公司）。
1.2 色谱柱：SE-54弹性石英毛细管柱（0.32mm×30mm，0.33μm）。
1.3 试药：水杨酸甲酯（山东新华隆信化工有限公司）、乙酸乙酯（山东新华隆信化工有限公司）。
2 测定方法
2.1 方法1
2.1.1 色谱条件。SE-54弹性石英毛细管柱（0.32mm×30mm，0.33μm）；载气：氮气；流速为2ml/min；汽化室温度180℃；检测器温度200℃；柱温100℃；进样量：1μl[1-2]。
2.1.2 对照品溶液的制备
（1）内标液的配制。取水杨酸甲酯80mg置于10ml容量瓶内，加乙酸乙酯溶解并定容至刻度（每毫升含8mg水杨酸甲酯），即得。
（2）对照品溶液的制备。精密称取龙脑对照品100mg至25ml容量瓶中，加适量乙酸乙酯溶解，加入内标液2毫升，用乙酸乙酯定容，即得。
2.1.3 供试品溶液的制备。取适量供试品内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，超声处理10分钟，放冷，摇匀，滤过，滤液转移至20毫升容量瓶内，加4毫升内标液，用乙酸乙酯定容，摇匀，即得。
2.1.4 专属性试验。依照处方取苏合香、檀香、乳香（制）、青木香，按样品制备工艺制成阴性对照样品，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，超声处理10分钟，放冷，摇匀，滤过，滤液转移至20毫升容量瓶内，加4毫升内标液，用乙酸乙酯定容，摇匀，即得阴性对照液，依上述方法测定，果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.1.5 精密度试验。取对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.99%，表明本方法精密度良好。
2.1.6 对照品的线性考察。分别精密称取冰片对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg至10ml容量瓶中，分别加入内标液2ml，加乙酸乙酯溶解并定容，依照2.1.1项下的色谱条件测定。以龙脑与内标峰面积比值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，冰片在0.5～8mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.1.7 重现性试验。称取同一批样品6份，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.98%，结果表明此方法的重現性良好。
2.1.8 准确度试验。取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的120%、140%、160%。测定含量并计算回收率，回收率为99.5%，RSD为0.86%。
2.1.9 样品稳定性试验。取同一批冰片样品，按供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、1、2、3、4、5小时，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的RSD=0.83%。结果表明供试品5小时内稳定。
2.1.10 样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量，结果三批样品的含量分别为42mg/片、43mg/片、43mg/片。
2.2 方法2
2.2.1 色谱条件。以聚乙二醇20000（PEG-20M）为固定相，涂布浓度10%；柱温140℃。进样量：1μl。
2.2.2 对照品溶液的制备。精密称取龙脑对照品50mg至10ml容量瓶中，加适量乙酸乙酯溶解并定容，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备。取适量供试品内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，精密称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.2.4 专属性试验。依照处方取苏合香、檀香、乳香（制）、青木香，按样品制备工艺制成阴性对照样品，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，精密称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得阴性对照液，依上述方法测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.2.5 精密度试验。取对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.83%，表明本方法精密度良好。
2.2.6 对照品的线性考察。分别精密称取冰片对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg、100.0mg至10ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并定容。依照2.2.1項下的色谱条件测定，记录色谱峰。以龙脑峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，冰片在0.5～10mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.2.7 重现性试验。称取同一批样品6份，测定含量并计算样品的RSD值，结果RSD为0.86%，结果表明此方法的重现性良好。
2.2.8 准确度试验。取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的120%、140%、160%。测定含量并计算回收率，计算回收率为99.6%，RSD为0.81%。
2.2.9 样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量，结果三批样品的含量分别为42mg/片、43mg/片、43mg/片。
3 讨论
冠心苏合咀嚼片是在精心筛选古代名方的基础上，经过现代科学提取加工精制而成的纯中药制剂。通过大量动物实验表明，冠心苏合咀嚼片可以恢复或部分恢复心肌缺血而引起的冠状动脉血流量下降，还能显著地降低缺血心肌对氧的消耗，从而缓解或消除心绞痛等症状。采用高效液相色谱法分析冰片质量，必须先对其进行衍生化前处理，形成具有较强紫外吸收的龙脑衍生物后进行测定。由于高效液相色谱法分析冰片质量采用操作复杂，所以一般采用气相色谱法[3-5]。本实验采用两种气相色谱法对冰片主要成分龙脑进行了测定。第一种方法与第二种方法具有相似的精密度和准确度，但第二种方法不采用内标物操作简便。本实验表明两种方法均分离效果好、准确，、专属性好，可用于冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量测定。
参考文献
[1]回瑞华，侯东岩，李铁纯，等.冠心苏合丸中挥发性成分的提取分析及其质量监控[J].分析试验室，2004，23（12）：21-24.
[2]汤瑶，王敏，邱宁婴，等.毛细管气相色谱法测定冠心苏合丸中有效成分的含量[J].药学进展，2002（5）：290-292.
[3]金智珠，章臣桂.中药速效救心丸中冰片含量的气相色谱测定[J].药物分析杂志，1984，4（1）：42.
[4]叶崇义，戴剑虹，黄镇峰.闪蒸-气相色谱法分析中药橡皮膏剂中樟脑等四种挥发性成分[J].中成药，1989，11（9）：15.
[5]罗燕燕，刘瑞玲，吴玢.气相色谱法测定甙烟灵中薄荷脑、异龙脑、龙脑的含量[J].药物分析杂志，1992，12（4）：240.
关键词：冠心苏合咀嚼片；含量；测定
冠心苏合咀嚼片为棕褐色片；气芳香，味苦、微甜，由苏合香、冰片、檀香、乳香（制）、青木香等组成。冠心苏合咀嚼片具有理气宽胸，止痛的功效。冠心苏合咀嚼片常用于心绞痛、胸闷憋气等。现代研究表明：冠冠心苏合咀嚼片对实验动物具有增加冠脉血流量；具有降低血压和减慢心率的作用。冰片别名为龙脑、龙脑香、脑子、冰片脑、梅花脑、片脑、老梅片、梅片等。冰片可用于用于闭证神昏、目赤肿痛、疮疡肿痛、溃后不敛等。《本草经疏》记载：“凡中风非外来之风邪，乃因气血虚而病者忌之；小儿吐泻后成惊者为慢脾风，切不可服，急惊属实热可用，慢惊属虚寒不可用；眼目昏暗属肝肾虚者不宜入点药。”龙脑为冰片主要考察指标，所以本实验采用气相色谱法对冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量进行测定。
1 仪器与试药
1.1仪器：GC900B高性能气相色谱仪（上海天普分析仪器有限公司）；KQ250DE超声波清洗器超声波检测仪器（烟台鑫康商贸有限公司）；CTLW-120实验室全自动洗瓶机（青岛永合创信电子科技有限公司）；H2050R台式高速冷冻离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；H.S11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；ELGA CENTRA 实验室中央供水系统（广州安一生物科技有限公司）；501静音无油空压机（上海苍茂实业有限公司）；PGN-3000北京谱莱析高纯氮气发生器（北京谱莱析科技有限公司）；RE-501旋转蒸发仪（深圳市朗诚实业有限公司）；AHS-6890自动顶空进样器（北京华仪三谱仪器有限责任公司）；AE224全触屏电子天平（海舜宇恒平科学仪器有限公司）。
1.2 色谱柱：SE-54弹性石英毛细管柱（0.32mm×30mm，0.33μm）。
1.3 试药：水杨酸甲酯（山东新华隆信化工有限公司）、乙酸乙酯（山东新华隆信化工有限公司）。
2 测定方法
2.1 方法1
2.1.1 色谱条件。SE-54弹性石英毛细管柱（0.32mm×30mm，0.33μm）；载气：氮气；流速为2ml/min；汽化室温度180℃；检测器温度200℃；柱温100℃；进样量：1μl[1-2]。
2.1.2 对照品溶液的制备
（1）内标液的配制。取水杨酸甲酯80mg置于10ml容量瓶内，加乙酸乙酯溶解并定容至刻度（每毫升含8mg水杨酸甲酯），即得。
（2）对照品溶液的制备。精密称取龙脑对照品100mg至25ml容量瓶中，加适量乙酸乙酯溶解，加入内标液2毫升，用乙酸乙酯定容，即得。
2.1.3 供试品溶液的制备。取适量供试品内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，超声处理10分钟，放冷，摇匀，滤过，滤液转移至20毫升容量瓶内，加4毫升内标液，用乙酸乙酯定容，摇匀，即得。
2.1.4 专属性试验。依照处方取苏合香、檀香、乳香（制）、青木香，按样品制备工艺制成阴性对照样品，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，超声处理10分钟，放冷，摇匀，滤过，滤液转移至20毫升容量瓶内，加4毫升内标液，用乙酸乙酯定容，摇匀，即得阴性对照液，依上述方法测定，果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.1.5 精密度试验。取对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.99%，表明本方法精密度良好。
2.1.6 对照品的线性考察。分别精密称取冰片对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg至10ml容量瓶中，分别加入内标液2ml，加乙酸乙酯溶解并定容，依照2.1.1项下的色谱条件测定。以龙脑与内标峰面积比值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，冰片在0.5～8mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.1.7 重现性试验。称取同一批样品6份，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.98%，结果表明此方法的重現性良好。
2.1.8 准确度试验。取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的120%、140%、160%。测定含量并计算回收率，回收率为99.5%，RSD为0.86%。
2.1.9 样品稳定性试验。取同一批冰片样品，按供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、1、2、3、4、5小时，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的RSD=0.83%。结果表明供试品5小时内稳定。
2.1.10 样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量，结果三批样品的含量分别为42mg/片、43mg/片、43mg/片。
2.2 方法2
2.2.1 色谱条件。以聚乙二醇20000（PEG-20M）为固定相，涂布浓度10%；柱温140℃。进样量：1μl。
2.2.2 对照品溶液的制备。精密称取龙脑对照品50mg至10ml容量瓶中，加适量乙酸乙酯溶解并定容，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备。取适量供试品内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，精密称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.2.4 专属性试验。依照处方取苏合香、檀香、乳香（制）、青木香，按样品制备工艺制成阴性对照样品，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10mL，密塞，精密称定重量，超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得阴性对照液，依上述方法测定，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.2.5 精密度试验。取对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.83%，表明本方法精密度良好。
2.2.6 对照品的线性考察。分别精密称取冰片对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg、100.0mg至10ml容量瓶中，加乙酸乙酯溶解并定容。依照2.2.1項下的色谱条件测定，记录色谱峰。以龙脑峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，冰片在0.5～10mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.2.7 重现性试验。称取同一批样品6份，测定含量并计算样品的RSD值，结果RSD为0.86%，结果表明此方法的重现性良好。
2.2.8 准确度试验。取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的120%、140%、160%。测定含量并计算回收率，计算回收率为99.6%，RSD为0.81%。
2.2.9 样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量，结果三批样品的含量分别为42mg/片、43mg/片、43mg/片。
3 讨论
冠心苏合咀嚼片是在精心筛选古代名方的基础上，经过现代科学提取加工精制而成的纯中药制剂。通过大量动物实验表明，冠心苏合咀嚼片可以恢复或部分恢复心肌缺血而引起的冠状动脉血流量下降，还能显著地降低缺血心肌对氧的消耗，从而缓解或消除心绞痛等症状。采用高效液相色谱法分析冰片质量，必须先对其进行衍生化前处理，形成具有较强紫外吸收的龙脑衍生物后进行测定。由于高效液相色谱法分析冰片质量采用操作复杂，所以一般采用气相色谱法[3-5]。本实验采用两种气相色谱法对冰片主要成分龙脑进行了测定。第一种方法与第二种方法具有相似的精密度和准确度，但第二种方法不采用内标物操作简便。本实验表明两种方法均分离效果好、准确，、专属性好，可用于冠心苏合咀嚼片中龙脑的含量测定。
参考文献
[1]回瑞华，侯东岩，李铁纯，等.冠心苏合丸中挥发性成分的提取分析及其质量监控[J].分析试验室，2004，23（12）：21-24.
[2]汤瑶，王敏，邱宁婴，等.毛细管气相色谱法测定冠心苏合丸中有效成分的含量[J].药学进展，2002（5）：290-292.
[3]金智珠，章臣桂.中药速效救心丸中冰片含量的气相色谱测定[J].药物分析杂志，1984，4（1）：42.
[4]叶崇义，戴剑虹，黄镇峰.闪蒸-气相色谱法分析中药橡皮膏剂中樟脑等四种挥发性成分[J].中成药，1989，11（9）：15.
[5]罗燕燕，刘瑞玲，吴玢.气相色谱法测定甙烟灵中薄荷脑、异龙脑、龙脑的含量[J].药物分析杂志，1992，12（4）：240.