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以云南个旧黑籽南瓜叶片基因组DNA为模板,固定反应程序,采用L<sub>16</sub>(4<sup>5</sup>)正交试验设计的方法,对影响ISSR-PCR反应的五因素(dNTPs,Mg<sup>2+</sup>,引物,Taq DNA聚合酶,模板DNA)在四个水平上进行优化试验。研究建立起了适于云南黑籽南瓜ISSR-PCR的最佳反应体系:25μl反应体系中含10×buffer 2.5μl、0.15mmol/L dNTPs