‘西伯利亚’百合LiHDS基因克隆及表达分析

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4-羟基-3-甲基-2赤藓磷酸合酶(4-hydroxy-3-methyl-2-butenyl diphosphate synthase, HDS)是单帖合成途径中的关键酶。为揭示其在‘西伯利亚’百合(Lilium ‘Siberia’)萜烯合成中的作用,本试验克隆了Li HDS基因,进行生物信息学分析、亚细胞定位和病毒诱导基因沉默(VIGS)功能验证,并采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)对该基因进行时空表达分析。结果表明, LiHDS基因开放阅读框为2 223 bp,编码蛋白包括740个氨基酸,理论分子量81 967.95,理论等电点为5.76,与小果野蕉(Musa acuminata)等HDS蛋白相似度较高, LiHDS蛋白主要定位在叶绿体。LiHDS在内花被片与外花被片中表达量最高,在根和叶中表达量最低。花被片中LiHDS基因在盛开期表达量最高,衰败期最低。LiHDS基因被沉默后,罗勒烯和芳樟醇释放量显著降低,分别下降79%和73%,说明LiHDS基因在百合单帖合成中起着重要作用。
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