【摘 要】
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目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选乙型肝炎病毒(HBV)核糖核酸酶RNase H蛋白反式激活基因差异表达的cDNA,克隆RNase H反式激活相关靶基因.方法:以RNase H表达质粒pcDNA3.
【机 构】
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首都医科大学北京佑安医院病理科,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心
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目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选乙型肝炎病毒(HBV)核糖核酸酶RNase H蛋白反式激活基因差异表达的cDNA,克隆RNase H反式激活相关靶基因.方法:以RNase H表达质粒pcDNA3.1(-)-RNase H转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文
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