人溶菌酶N端与Exendin-4嵌合蛋白的基因克隆及原核表达

来源 :暨南大学学报(自然科学与医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:cjfandhf
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目的:克隆嵌合多肽人溶菌酶N端-Exendin-4基因并进行原核表达和纯化。方法:通过重组PCR技术将人溶菌酶N端74个氨基酸的基因序列与Exendin-4多肽基因序列相连接,其间引入一段由凝血酶和二肽基肽酶识别位点组成的连接序列。以嵌合基因hLYZ(N74)-Ex4与质粒pET-32a(+)构建原核表达体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。表达蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化、Westernblotting鉴定;透析复性后,以肠激酶切割并回收目的多肽。结果:重组质粒pET-32a/hLYZ(N74
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