论文部分内容阅读
目的
通过反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)检测甲型流行性感冒(以下简称为甲流)病毒，建立一种快速、简便的可视化核酸检测技术。
方法针对甲流病毒血凝素基因区段设计RT-LAMP引物。通过检测不同流感病毒验证RT-LAMP的特异性，通过检测倍比稀释的RNA样本验证RT-LAMP的灵敏度。用羟基萘酚蓝(HNB)染料对产物进行可视性检测，以凝胶电泳进行结果验证。最后用RT-LAMP检测临床样本，并比较与荧光定量PCR的一致性。
结果RT-LAMP的引物特异性好，可准确扩增甲流病毒。通过对稀释模板的扩增，得出RT-LAMP的灵敏度为2.5×103拷贝/mL。另外，RT-LAMP扩增结果可通过HNB的颜色改变进行判定，与凝胶电泳的效果一致。对临床样本检测后，RT-LAMP和荧光定量PCR的一致性好。
结论RT-LAMP可快速、简便地检测甲流病毒。