【摘 要】
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为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽（bTAP）的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母（Pic
【机 构】
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江苏畜牧兽医职业技术学院,苏州国家高新技术产业开发区通安镇动物防疫站,扬州大学兽医学院
【基金项目】
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江苏省自然科学基金项目（BK2011536）, 泰州市科技计划项目（TG0904）
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为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽（bTAP）的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母（Pichia pastoris）pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9K-bTAP。用SalⅠ酶切线性化pPIC9K-bTAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达。SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好
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