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为获得具有生物活性的骨钙素蛋白,以鸡颅骨提取的总RNA为模板,RT—PCR法克降鸡骨钙素成熟肽DNA,连接至原核表达载体pET-32a(+),构建表达质粒pET-32a(+)-rchOC。质粒转化Rosetta—gami(DE3)pLyS宿主菌,IPTG诱导表达含His标签的重组蛋白His—rchOC。肠激酶酶切去除融合蛋白中的His标签后获得重组骨钙素蛋白(rchOC)。通过与羟基磷/灭行结合试验、MTT及PNPP法分析该蛋白l,丰物学活性。结果显示:重组骨钙素蛋白能与羟基磷灰石结合,抑制成骨细胞中碱性