诺氟沙星单克隆抗体的制备及初步应用

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采用优化的碳二亚胺法制备诺氟沙星(NOR)人工抗原,紫外扫描和红外光谱图表明人工抗原偶联成功。采用细胞融合技术筛选抗NOR单克隆抗体(NORmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备NORmAb,建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线。结果表明,筛选的3株杂交瘤细胞分泌的抗体为IgG1亚型,具k轻链;建立的icELISA标准曲线在PBS中的的线性检测范围为0.04~43.6ng/mL,IC50值为0.62ng/mL,检测限(LOD)为0.02ng/mL;抗体与环丙沙星(87.2%)、培氟沙星(76.9%)、依诺沙星(66.8%)、恩诺沙星(48.6%)和洛美沙星(36.6%)有较高的交叉反应率;禽肉基质中NOR添加回收率满足检测要求。
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