【摘 要】
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目的 观察趋化素样因子-1(CKLF-1)对骨代谢过程的影响,探讨Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号转导通路在此过程中的作用机制.方法 将C57BL/6小鼠骨髓内单个核细胞
【机 构】
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730050,兰州军区总医院全军骨科中心关节外科
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目的 观察趋化素样因子-1(CKLF-1)对骨代谢过程的影响,探讨Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号转导通路在此过程中的作用机制.方法 将C57BL/6小鼠骨髓内单个核细胞培养,给予不同浓度的趋化素样因子-1进行诱导后随机分组,分别运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞TLR4、骨保护素(OPG)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子κB抑制蛋白-α抗体(IκB-α)的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定培养的细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)的表达,比较各组指标表达变化.结果 与正常对照组相比,CKLF-1可随着浓度(I×10-、1×10-6和1×10-5 mol/L)升高,上调TLR4 mRNA的表达水平(P＜0.05),且CKIF-1不同浓度组之间相互比较,TLR4 mRNA的表达水平均差异有统计学意义(P＜0.05),浓度为1×10-5 mol/L的CKLF-1组上调幅度最为显著;经不同浓度CKLF-1诱导后,增加ICAM-1蛋白表达水平分别为112.50±10.01、173.60 ± 15.82及191.90±20.23(P＜0.05);下调IκB-α蛋白表达水平分别为0.68±0.05、0.59±0.05及0.51 ±0.05(P ＜0.05);下调OPG的蛋白表达水平分别为0.88±0.07、0.75±0.07及0.63 ±0.07(P ＜0.05);升高IL-6表达水平分别为(3.73±0.35) ng/L、(4.32±0.40)及(6.51 ±0.40) ng/L(P ＜0.05);且CKLF-1不同浓度组之间相互比较,ICAM-1、IL-6、IκB-α和OPG的表达水平差异有统计学意义(P＜0.05),当CKLF-1浓度为1×10-5 mol/L时效果最为明显.结论 CKLF-1可调节TLR4mRNA、ICAM-1、OPG、IκB-α的蛋白表达和IL-6的表达,其对骨代谢的影响可能与促炎反应和激活TLR4/NF-κB信号转导通路相关.
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