【摘 要】
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目的:研究沉默非同源重组修复(non-homologous endjoining,MHEJ)通路中关键蛋白Ku70在牙髓干细胞增殖和凋亡中的作用,分析其机制.方法:提取健康恒牙牙髓组织,进行牙髓干细胞
【机 构】
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重庆市沙坪坝区人民医院口腔科 重庆400030;陆军军医大学第一附属医院口腔科 重庆400038
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目的:研究沉默非同源重组修复(non-homologous endjoining,MHEJ)通路中关键蛋白Ku70在牙髓干细胞增殖和凋亡中的作用,分析其机制.方法:提取健康恒牙牙髓组织,进行牙髓干细胞培养.采用脂多糖诱导人牙髓干细胞,分为对照组、阴性对照组、脂多糖组、沉默组和沉默+脂多糖组.观察Ku70免疫组化情况,进行细胞增殖、细胞凋亡实验,检测γ-H2A.X、Ku70、X线修复交叉互补基因4(X-ray repair cross complementary gene4,Xrcc4)、Rad51 mRNA、Cleaved Caspase-3、p-p38水平.结果:与沉默组相比,对照组、阴性对照组、脂多糖组、沉默+脂多糖组各时间段牙髓干细胞增殖降低;沉默+脂多糖分髓干细胞增殖高于脂多糖组(P＜0.05).随时间延长,脂多糖组牙髓干细胞增殖不断降低,其他四组牙髓干细胞增殖不断升高,其中在第5d变化最明显.第5d,与沉默组相比,对照组、阴性对照组牙髓干细胞凋亡率、γ-H2A.X、Rad51 mRNA,Cleaved Caspase-3降低,p-p38升高;脂多糖组、沉默+脂多糖组各项指标较高,p-p38降低;对照组、阴性对照组、脂多糖组、沉默+脂多糖组Ku70、Xrcc4 mRNA降低(P＜0.05).沉默+脂多糖组牙髓干细胞凋亡率、γ-H2A.X、Rad51 mRNA,Cleaved Caspase-3低于脂多糖组,p-p38高于脂多糖组(P＜0.05).结论:沉默Ku70能促进脂多糖诱导的牙髓干细胞增殖,抑制其凋亡,其可能与γ-H2A.X、Rad51 mRNA表达降低,Ku70,Xrcc4升高有关.
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