【摘 要】
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目的 建立基于流式细胞术的发酵乳制品中乳酸菌快速计数方法,实现发酵乳制品中乳酸菌的快速定量检测.方法 使用5(6)-羧基荧光素二乙酸酯[5-(and 6)-carboxyfluorescein diace
【机 构】
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上海市质量监督检验技术研究院/国家食品质量监督检验中心(上海), 上海 201114;上海师范大学生命科学学院, 上海 200234;上海海关动植物与食品检验检疫技术中心, 上海 200135
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目的 建立基于流式细胞术的发酵乳制品中乳酸菌快速计数方法,实现发酵乳制品中乳酸菌的快速定量检测.方法 使用5(6)-羧基荧光素二乙酸酯[5-(and 6)-carboxyfluorescein diacetate,cFDA]和碘化丙啶(propidium iodid,PI)2种荧光染料对乳酸菌进行染色,经流式细胞仪检测乳酸菌的荧光信号,从而实现细菌定量计数.在分析过程中对染色剂浓度、荧光通道阈值进行优化,并将流式计数结果与现行国标方法进行对比研究.结果 在样品浓度为104 CFU/mL(g)时,通过0.05μg/mL的PI和10μmol/L的cFDA染色,在绿色荧光通道增益为100,红色荧光通道增益达到1000时,能够达到最佳的流式检测条件,且样品检测结果与现行国标检测方法存在显著的正相关关系(P<0.01),2种方法测试结果相关系数值为0.949.结论 流式细胞术具有灵敏度高、检测时间短、稳定性高、重现性好等优点,对于货架期普遍较短,放行压力大的乳制品生产企业来说,能够缩短检测时间,实现产品快速放行上架.
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