【摘 要】
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目的研究抑癌基因p16INK4A在卵巢癌中的表达变化,分析这种差异表达与甲基化的关系.方法逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测7种卵巢癌细胞系、18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织
【机 构】
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武汉市华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科,430022;
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目的研究抑癌基因p16INK4A在卵巢癌中的表达变化,分析这种差异表达与甲基化的关系.方法逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测7种卵巢癌细胞系、18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织中p16INK4A基因的表达,Weste Blot对p16INK4A蛋白进行定量检测,分析蛋白水平上的P16INK4A表达的变化,并与正常卵巢组织中的p16INK4A表达情况进行对照.同时用甲基化特异性的PCR技术(MSP)对细胞系和组织的p16INK4A DNA进行甲基化分析.5-脱氧杂氮胞苷对细胞进行脱甲基化处理后检测细胞中p16INK4A基因的表达;体外体内检测细胞增殖变化.结果卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中p16INK4A表达下降或缺失,与正常卵巢组织中的p16INK4A表达相比,差异具有显著意义(P＜0.05).蛋白的表达检测也得到相同的结果.MSP检测发现3种卵巢癌细胞株、6例卵巢癌组织p16INK4A第1外显子甲基化表现,细胞和组织中的甲基化率分别为42.86%和33.33%,甲基化者p16INK4A表达均下降.5-脱氧杂氮胞苷处理能使p16INK4A基因重表达,细胞增殖减慢,裸鼠荷瘤体积和重量明显下降.结论p16INK4A作为一种抑癌基因,它的表达缺失或下降在卵巢癌的发生中起重要作用,外显子甲基化是导致这种表达的主要原因,脱甲基化处理可以抑制细胞的增殖.
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