【摘 要】
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目的:构建表达香菇珊瑚红色荧光蛋白(discosomasp red fluorescent protein,DsRed)的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株,并检测其生物学特性。方法:用Gen EscortTMⅡ转染试剂将p
【机 构】
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东南大学附属中大医院检验科,南通大学第二附属医院普外科,南通大学附属南通市肿瘤医院内科,
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目的:构建表达香菇珊瑚红色荧光蛋白(discosomasp red fluorescent protein,DsRed)的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株,并检测其生物学特性。方法:用Gen EscortTMⅡ转染试剂将p DsRed质粒导入小鼠黑色素瘤B16F10细胞,G418加压培养联合极限稀释法建立稳定、高水平表达DsRed的单克隆细胞系。FCM检测B16F10和B16F10-Red细胞的细胞周期。比较B16F10-Red和B16F10细胞的克隆球形成能力和小鼠体内致瘤能力。结果:稳定表达DsRed的小鼠黑色素瘤B16F10-Red细胞株基本保持了其亲代细胞的特征,能在C57BL/6小鼠腹部皮下形成肿瘤并继续生长和转移。结论:B16F10-Red细胞株构建成功,其移植瘤模型成瘤率和转移情况同B16F10肿瘤相比无明显差别。
OBJECTIVE: To construct a murine melanoma B16F10-Red cell line expressing the discosomasp red fluorescent protein (DsRed) and to detect its biological characteristics. METHODS: pDsRed plasmid was transfected into mouse melanoma B16F10 cells by Gen EscortTM Ⅱ transfection reagent. The stable and high expression of DsRed monoclonal cell line was established by G418 pressurized culture combined with limiting dilution. FCM was used to detect the cell cycle of B16F10 and B16F10-Red cells. The clonogenic capacity of B16F10-Red and B16F10 cells was compared with that of mice in vivo. Results: The murine melanoma B16F10-Red cell line stably expressing DsRed basically maintained the characteristics of its parental cells and formed tumors in the abdominal region of C57BL / 6 mice and continued to grow and metastasize. Conclusion: The B16F10-Red cell line was successfully constructed. The tumorigenic rate and metastasis of the B16F10-Red cell line were not significantly different from those of the B16F10 tumor.
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