慢病毒Tet-On系统调控Notch1-EGFP融合蛋白在PC12细胞中表达的研究

来源 :中国应用生理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gmzz2009
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目的:构建Te-t On系统调控的人源性Notch1胞内段(NICD)和EGFP融合蛋白的慢病毒真核表达载体,并探讨Notch1-EGFP在PC12细胞中的表达条件。方法:采用RT-PCR从人胎盘组织中获得NICD的cDNA,利用PCR扩增pEGFP-C1质粒中EGFP的编码序列,两者均定向克隆到pcDNA3.1(+)质粒中组成Notch1-EGFP片段,将该片段进一步酶切回收,并定向克隆到pLVX-Tigh-t puro载体获得pLVX-Notch1-EGFP。将构建好的质粒进行病毒包装并感染PC12细
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