V5标记的猪圆环病毒2型Cap蛋白重组杆状病毒表达载体的构建

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：leijian_118

【摘要】

：

试验旨在利用真核表达系统构建V5标记的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白的表达载体。采用基因工程技术将V5标签引入到PCV2 ORF2基因C末端,并将标记基因定向克隆入pFastBacHTA载体,

【作者】

：

徐国梁海英曾智勇王彬黄涛汤德元代振江叶百川张

【机构】

：

贵州大学动物科学学院

【出处】

：

中国畜牧兽医

【发表日期】

：

2018年7期

【关键词】

：

猪圆环病毒2型(PCV2) Cap-V5蛋白重组杆状病毒表达载体 porcine circovirus type 2 （PCV2）Cap V5 protei

【基金项目】

：

国家自然科学基金“猪圆环病毒iDNA标记疫苗及其免疫应答效果的研究”（31560688）

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试验旨在利用真核表达系统构建V5标记的猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白的表达载体。采用基因工程技术将V5标签引入到PCV2 ORF2基因C末端,并将标记基因定向克隆入pFastBacHTA载体,将pFastBacHTA-ORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,使用脂质体介导法将鉴定后的重组杆状病毒质粒转染于Sf9细胞中;运用间接免疫荧光试验（IFA）、SDS-PAGE和Western blotting试验对Sf9细胞中V5标记Cap蛋白的表达进行验证。结果显示,本试验成功将V5

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