【摘 要】
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为建立猪流行性乙型脑炎病毒（JEV）的定量检测方法，本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针，并以E基因重组质粒作为标准品，建立检测JEV的TaqMan荧光定量PCR方法。结
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项(201203082)
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为建立猪流行性乙型脑炎病毒（JEV）的定量检测方法，本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针，并以E基因重组质粒作为标准品，建立检测JEV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示，该方法的灵敏度可达到10个拷贝，是常规PCR灵敏度的100倍。该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性。重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2％。通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症样品，将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较，结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同，比
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