【摘 要】
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目的 构建雄黄(四硫化四砷, tetra-arsenic tetra-sulfide, As4S4)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡前后的差异蛋白质组表达谱.方法 首先应用MT
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院血液科,陕西省血液中心,军事医学科学院国家生物医学分析中心
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目的 构建雄黄(四硫化四砷, tetra-arsenic tetra-sulfide, As4S4)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡前后的差异蛋白质组表达谱.方法 首先应用MTT法、透射电镜、Annexin V/PI双染法和激光共聚焦显微镜的一系列体外实验定性化和定量化雄黄诱导NB4-R1细胞凋亡的作用;然后应用高分辨二维双向电泳技术构建雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱.结果 雄黄对NB4-R1细胞的生长抑制效应呈剂量和时间依赖性,雄黄作用24 h半数抑制浓度(IC50)为(24.06±0.19) μmol/L,48 h IC50为(9.50±0.13) μmol/L,72 h IC50为(6.55±0.03) μmol/L;确定了25 μmol/L 雄黄作用24 h和48 h时分别为NB4-R1细胞凋亡主群的早期和凋亡晚期阶段;成功构建了雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱, ImageMasterTM 2D Platinum图像分析软件分析显示,未处理组(R0)、处理24 h组(R24)和处理48 h组(R48)的蛋白质组表达图谱分别平均含1 069、 975和893个点;R24与R0的匹配率为79.94%, R48与R0的匹配率为69.33%, R24与R48的匹配率为71.91%.结论 成功构建雄黄诱导维甲酸耐药细胞株NB4-R1凋亡前后的差异蛋白质组表达谱,为今后从整体上更好地理解雄黄诱导耐药APL细胞凋亡的蛋白质组传导网络以及筛选恶性血液肿瘤新型生物标志物和药物靶标方面奠定了基础.
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