【摘 要】
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克雷伯氏肺炎杆菌是一种重要工业微生物,菌细胞表面具有荚膜结构,荚膜对于菌株的生理特性和工业应用具有重要的影响.Rcs磷酸化信号系统是一种对菌株荚膜合成具有调控作用的信
【机 构】
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上海大学生命学院,上海200444;中国科学院上海高等研究院,上海201210
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克雷伯氏肺炎杆菌是一种重要工业微生物,菌细胞表面具有荚膜结构,荚膜对于菌株的生理特性和工业应用具有重要的影响.Rcs磷酸化信号系统是一种对菌株荚膜合成具有调控作用的信号系统.利用Red同源重组技术,分别构建了基因rcsA,rcsB缺失的菌株,还构建了基因rcsA,rcsB单独过表达的菌株.这些菌株的生理特性的研究结果表明,rcsA及rcsB基因的缺失会显著降低荚膜合成水平,进而提高外源DNA的转化细胞的效率.rcsA及rcsB缺失菌株分别在以葡萄糖和甘油为碳源的培养基中培养时,菌体更易从发酵液中进行分离,主要代谢产物2,3-丁二醇和1,3-丙二醇的产量均有少量提高.rcsA和rcsB基因的过表达均抑制菌株生长,降低外源DNA的转化细胞的效率.相对于野生菌,过表达的菌胞外多糖的含量提高,发酵液的黏度增加,rcsA过表达菌株胞外多糖的含量达到了10.33 g/L,是野生菌的5倍.通过调控rcsA及rcsB基因的活性可调控菌株荚膜多糖的合成,进而影响菌株细胞沉降、代谢物合成、胞外多糖含量等多方面的生理特性.
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