【摘 要】
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目的比较抗CD133/CD3双特异性抗体介导的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)与普通CIK对胰腺癌、胃癌和卵巢癌等细胞系的杀伤作用。方法利用杂交瘤技
【机 构】
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解放军总医院基础医学研究所免疫研究室
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目的比较抗CD133/CD3双特异性抗体介导的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)与普通CIK对胰腺癌、胃癌和卵巢癌等细胞系的杀伤作用。方法利用杂交瘤技术制备鼠抗人CD133单克隆抗体,用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测腹水效价;经过蛋白G亲和层析法纯化得到CD133抗体,在温和的条件下与鼠抗人CD3单抗进行化学偶联,制备抗CD133和抗CD3的双特异性抗体;CCK8试剂盒检测CIK和双特异性抗体介导的CIK杀伤肿瘤细胞系。结果收获腹水效价为1∶50 000,通过标准曲线计算出CD133单抗的浓度为3.2 mg/ml;成功构建了抗CD133/CD3双功能特异性抗体介导的CIK;在相同的效靶比条件下,抗CD133/CD3介导的CIK对表达CD133的胰腺癌细胞系SW1990、胃癌细胞系SGC7901和卵巢癌细胞系A2780有更强的杀伤作用,与单纯CIK相比有显著差异,在效靶浓度为20∶1时,抗CD133/CD3双特异性抗体介导CIK细胞较普通CIK对SW1990细胞株杀伤率提高了30.99%,对SGC7901细胞株杀伤率提高了24.42%(P<0.05)。结论抗CD133/CD3双功能抗体可以显著改善CIK对CD133阳性肿瘤细胞的杀伤作用。
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