【摘 要】
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目的:探讨益气养阴活血方通过调控核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的肾脏保护作用
【基金项目】
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国家自然基金:(No.82074493); 河南省自然基金面上项目:(NO.2023004102); 河南省中医药学科领军人才项目(豫卫中医函(2021)8号);
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目的:探讨益气养阴活血方通过调控核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)信号通路对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的肾脏保护作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠40只,适应性喂养1周后,随机分为:空白组、模型组、缬沙坦组、益气养阴活血方等剂量(等剂量)组及高剂量(高剂量)组。除空白组外各组均应用高脂高糖喂养,联合单次注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN大鼠模型。造模成功后中药两组均灌服益气养阴活血方颗粒剂,缬沙坦组灌服缬沙坦,空白组和模型组灌服生理盐水,6周后留取大鼠24小时尿液、血液和肾脏组织。生化检测各组大鼠24h尿总蛋白定量(24-UTP)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、葡糖糖(GLU)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)水平;HE染色光镜观察肾组织病理改变;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织中Nrf2、血红素加氧酶-1(home oxygenase-1,HO-1)、NLRP3蛋白水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肾脏Nrf2、HO-1、NLRP3mRNA表达水平。结果:生化:与空白组相比,模型组24hUTP、Scr、BUN、GLU、CHO、TG均显著升高(P<0.01);与模型组对比,各干预组24hUTP、Scr、BUN、GLU、CHO、TG均显著降低(P<0.05或P<0.01)。ELISA:与空白组相比,模型组血清IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各干预组血清IL-1β、IL-18水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。肾脏病理:与空白对比,模型组大鼠肾脏组织病变严重;与模型组对比,各干预组肾脏病理均有改善。WB及PCR:与空白组对比,模型组肾脏Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及Nrf2、HO-1蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01),NLRP3mRNA、NLRP3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);与模型组对比,各干预组Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),NLRP3mRNA、NLRP3蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论:益气养阴活血方可能通过调控Nrf2/NLRP3信号通路,减轻氧化应激,抑制DN大鼠炎症反应,从而改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害。
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