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[摘要] 目的 探讨肺炎患儿外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及T细胞免疫指标变化及意义。 方法 选取2013年8月～2014年8月我院进行治疗的肺炎患儿95例，包括细菌性肺炎35例，支原体肺炎32例，病毒性肺炎28例，同时选取正常体检儿童25例作为对照组。对四组外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及T细胞免疫指标进行测定。 结果 细菌性肺炎及支原体肺炎患儿外周血hs-CRP水平明显高于对照组（P<0.05）。病毒性肺炎组患儿外周血hs-CRP水平与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。细菌性肺炎患儿PCT水平及阳性数显著高于其他三组（P<0.05）。支原体肺炎及病毒性肺炎患儿PCT与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。细菌性肺炎、支原体肺炎、病毒性肺炎CD4+，CD4+/CD8+、CD4+CD25+ Treg与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。细菌性肺炎组、支原体肺炎组CD8+与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。 结论 肺炎患儿存在细胞免疫失调，在临床检测中可以把hs-CRP、PCT作为鉴别患儿不同类型肺炎的指标。
[关键词] 肺炎；外周血；超敏C反应蛋白；降钙素原；T细胞免疫指标
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2015）18-55-03
[Abstract] Objective To explore the changes and significance of high sensitivity C reactive protein，procalcitonin and T cell immune index of peripheral blood in children with pneumonia. Methods 95 children with pneumonia from 2013 August to 2014 August in our hospital were treated，including 35 cases of bacterial pneumonia，32 cases of mycoplasma pneumonia，28 cases of viral pneumonia，and 25 cases of normal children were selected as control group.The high sensitivity C reactive protein，procalcitonin and T cell immune indexes of peripheral blood in four groups were determined. Results The level of hs-CRP in peripheral blood of bacterial pneumonia and mycoplasma pneumonia were significantly higher than the control group（P<0.05）.The difference was not statistically significant in the hs-CRP level of peripheral blood between the viral pneumonia group and the control group.The level and positive of PCT in children with bacterial pneumonia were significantly higher than the other three groups（P>0.05）.The difference was not statistically significant in the level and positive of PCT among mycoplasma pneumonia group，viral pneumonia group and control group（P>0.05）.The CD4+，CD4+/CD8+，CD4+CD25+ and Treg in bacterial pneumonia group，mycoplasmapneumonia group and viral pneumonia group had statistically significant difference compared with the control group（P<0.05）.The difference had statistical significance in the CD8+ among bacterial pneumonia group，mycoplasma pneumonia group and control group（P<0.05）. Conclusion Children with pneumonia have cellular immune dysfunction，hs-CRP，PCT in clinical can be used to identify different types of children’s pneumoniaindex.
[Key words] Pneumonia；Peripheral blood；High sensitivity C reactive protein；Procalcitonin；T cell immune index
肺炎支原体为临床上引起小儿肺炎的重要病原，其好发于秋冬季节[1-2]。免疫学机制在肺炎支原体肺炎的发生、发展过程中起着重要作用。辅助性T细胞（monoclonal antibody to CD4，CD4+）、辅助性T细胞（monoclonal antibody to CD25，CD25+），可维持人体免疫反应平衡[3-4]。为提高临床诊断及救治成功率，本研究探讨了肺炎患儿外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及T细胞免疫指标变化及意义，现报道如下。 1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年8月～2014年8月我院进行治疗的肺炎患儿95例，所有患儿皆符合小儿肺炎诊断标准[5]。其中男49例，女46例， 年龄2～7岁，平均（3.6±0.7）岁，平均病程（4.5±0.7）d。95例患儿中，包括细菌性肺炎（35例，均经痰或咽拭子细菌培养证实），支原体肺炎（32例，肺炎支原体IgM抗体均为阳性），病毒性肺炎（28例，血清病毒特异性IgM抗体均为阳性）。同时选取正常体检儿童25例作为对照组。四组患儿一般情况比较，差异无统计学意义（P>0.05）。具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 T淋巴细胞亚群的测定 采集入组患儿清晨空腹外周肘静脉血2mL，分离、采取外周血单个核细胞，并用尼龙棉柱分离出T淋巴细胞，用Coulter公司的流式细胞仪检测。
1.2.2 超敏c反应蛋白（C reactive protein，hs-CRP）检测 hs-CRP检测的相关试剂均来自于购自西门子医学诊断产品有限公司。采用免疫散射比浊法。
1.2.3 无激素活性的降钙素前肽物质（procalcitonin，PCT）检测 采用酶联荧光法检测PCT，仪器配套试剂于mini-VIDAS分析仪上进行，PCT>0.5μg/L则为阳性。
1.3 观察指标
观察各组外周血hs-CRP、PCT变化，并对各组外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+Treg水平进行比较。
1.4 统计学方法
统计软件采用SPSS17.0，计量资料采用t检验或F检验，计数资料用x2检验，检验水准α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组外周血hs-CRP比较
细菌性肺炎及支原体肺炎患儿的外周血hs-CRP水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。病毒性肺炎组患儿外周血hs-CRP水平与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.2 各组外周血PCT检测结果比较
细菌性肺炎患儿的PCT水平及阳性数显著高于其他三组，差异有统计学意义（P<0.05）。支原体肺炎及病毒性肺炎患儿的PCT与对照组比较，差异无统计学意义。见表2。
2.3 各组外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+Treg水平比较
细菌性肺炎、支原体肺炎、病毒性肺炎的CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+ Treg与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。细菌性肺炎组、支原体肺炎组的CD8+与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。
3 讨论
小儿肺炎临床高发，发病时间北方为 冬、春季，南方则为夏、秋季[6-7]。其病因主要为呼吸道合胞病毒或肺炎支原体感染，患儿一旦发病，其正常的免疫平衡被打破，CD4+/CD8+的比值出现失衡状态，将导致机体出现一系列免疫系统反应[8-9]。
研究显示，在细菌感染时机体的hs-CRP水平显著升高，而支原体、病毒感染时，hs-CRP水平表现为正常或轻度的升高[10-11]，其具有较高的特异性和敏感性，因此临床把hs-CRP水平作为诊断、鉴别细菌感染的可靠指标。CD4+CD25+调节性T细胞可以分泌多种抑制性细胞因子，如IL-4、IL-10或TGF-β等，但其是否通过可溶性细胞因子发挥作用有多种不同的实验结果[12-13]。实验发现用IL-4、IL-10或TGF-B的中和抗体不能逆转CD4+CD25+调节性T细胞抑制效应，来源于IL-4-或IL-10-/小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞在体内仍然具有完全的免疫抑制作用[14-15]。
本研究中，细菌性肺炎及支原体肺炎患儿外周血hs-CRP水平明显高于对照组（P<0.05）。病毒性肺炎组患儿外周血hs-CRP水平与对照组比较，差异无统计学意义。细菌性肺炎患儿PCT水平及阳性数显著高于其他三组（P<0.05）。支原体肺炎及病毒性肺炎患儿PCT与对照组比较，差异无统计学意义。说明hs-CRP是一项非常敏感的炎症标志物，但缺乏特异性，PCT水平可作为鉴别细菌性肺炎与支原体肺炎的指标。
本研究中，细菌性肺炎、支原体肺炎、病毒性肺炎CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。细菌性肺炎组、支原体肺炎组CD8+与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。说明T细胞免疫抑制作用可以激活体内大量病原微生物的存活与复制，通过CD4+CD25+Treg细胞的活化作用而作用于效应T细胞来抑制机体免疫反应，以避免机体过度免疫应答所产生的病理损害，从而维持机体的慢性感染状态。
[参考文献]
[1] 胡亚美，江载芳，诸福棠.实用儿科学[M].第7版.北京：人民卫生出版社，2002：821-825.
[2] 刘清泉.CD4+CD25+调节性T细胞和感染免疫[J].医学研究生报，2006，19（8）：741-743.
[3] Wu HY，Maron R，Tukpah AM，et al.Mucosal anti-CD3 monoclonal antibody attenuates collagen-induced arthritis that is associated with induction of LAP+ regulatory T cells and is enhanced by administration of an emulsome-based Th2-skewing adjuvant？[J].Immunol，2010，185（6）：3401-3407. [4] 严敦煌.支气管肺炎患儿治疗前后血清SOD、CGRP和T淋巴细胞亚群检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2006，19（6）：465-466.
[5] Venet F，Pachot A，Debard AL，et al.Human CD4+CD25+regulatory T lymphoeytes inhibit lipopolysaccharideinduced monocyte survival through a Fas/Fas ligand-dependent mechanism[J].J Immunol，2006，177（9）：6540-6547.
[6] 李超，袁宝军.CD4+CD25+调节性T细胞在呼吸系统疾病中的作用[J].中国老年学杂志，2012，32（5）：1085-1088.
[7] Wan Q，Kozhaya L，Imberg K，et al.Probing the effector and suppressive functions of human T cell subsets using antigen-specific engineered T cell receptors[J].PLoS One，2013，8（2）：287-293.
[8] Braitch M，Harikrishnan S，Robins RA，et al.Glucocorticoids increase CD4+CD25+cell percentage and Foxp3 expression in patients with multiple sclerosis[J].Acta Neurol Scand，2009，119（25）：239-245.
[9] Nakagirit J，Inoue M，Motii E，et al.Local IL-17 production and a decrease in peripheral blood regulatory T cells in an animal model of bronchiolitis obliterans[J].Transplatation，2010，89（11）：1312-1319.
[10] 黄花荣，刘甜甜，魏菁，等.哮喘患儿外周血 CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系[J].中华临床医师杂志（电子版），2009，3（3）：355-361.
[11] 张秀秀，曲书强.毛细支气管炎发病中细胞因子作用的研究进展[J].国际免疫学杂志，2011，34（6）：365-367.
[12] 鞠云飞，孙立锋，胡华，等.甲泼尼龙对哮喘患儿外周血 CD4+CD25+调节性T细胞影响的体外研究[J].中国临床药理学杂志，2011，27（11）：830-832.
[13] 郭智兰.CD4+CD25high+CD127lowTreg细胞在细支气管炎患儿外周血中的表达及意义[D].郑州：郑州大学，2013：23-25.
[14] 毛静芳.RSV毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞与Th17细胞功能变化及意义[J].中国医药指南，2012，10（17）：541-542.
[15] 郑晓莉，薛丽华.肺炎患儿外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及细胞免疫指标变化及意义[J].临床儿科杂志，2013，31（1）：22-25.
（收稿日期：2015-06-03）
[关键词] 肺炎；外周血；超敏C反应蛋白；降钙素原；T细胞免疫指标
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2015）18-55-03
[Abstract] Objective To explore the changes and significance of high sensitivity C reactive protein，procalcitonin and T cell immune index of peripheral blood in children with pneumonia. Methods 95 children with pneumonia from 2013 August to 2014 August in our hospital were treated，including 35 cases of bacterial pneumonia，32 cases of mycoplasma pneumonia，28 cases of viral pneumonia，and 25 cases of normal children were selected as control group.The high sensitivity C reactive protein，procalcitonin and T cell immune indexes of peripheral blood in four groups were determined. Results The level of hs-CRP in peripheral blood of bacterial pneumonia and mycoplasma pneumonia were significantly higher than the control group（P<0.05）.The difference was not statistically significant in the hs-CRP level of peripheral blood between the viral pneumonia group and the control group.The level and positive of PCT in children with bacterial pneumonia were significantly higher than the other three groups（P>0.05）.The difference was not statistically significant in the level and positive of PCT among mycoplasma pneumonia group，viral pneumonia group and control group（P>0.05）.The CD4+，CD4+/CD8+，CD4+CD25+ and Treg in bacterial pneumonia group，mycoplasmapneumonia group and viral pneumonia group had statistically significant difference compared with the control group（P<0.05）.The difference had statistical significance in the CD8+ among bacterial pneumonia group，mycoplasma pneumonia group and control group（P<0.05）. Conclusion Children with pneumonia have cellular immune dysfunction，hs-CRP，PCT in clinical can be used to identify different types of children’s pneumoniaindex.
[Key words] Pneumonia；Peripheral blood；High sensitivity C reactive protein；Procalcitonin；T cell immune index
肺炎支原体为临床上引起小儿肺炎的重要病原，其好发于秋冬季节[1-2]。免疫学机制在肺炎支原体肺炎的发生、发展过程中起着重要作用。辅助性T细胞（monoclonal antibody to CD4，CD4+）、辅助性T细胞（monoclonal antibody to CD25，CD25+），可维持人体免疫反应平衡[3-4]。为提高临床诊断及救治成功率，本研究探讨了肺炎患儿外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及T细胞免疫指标变化及意义，现报道如下。 1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年8月～2014年8月我院进行治疗的肺炎患儿95例，所有患儿皆符合小儿肺炎诊断标准[5]。其中男49例，女46例， 年龄2～7岁，平均（3.6±0.7）岁，平均病程（4.5±0.7）d。95例患儿中，包括细菌性肺炎（35例，均经痰或咽拭子细菌培养证实），支原体肺炎（32例，肺炎支原体IgM抗体均为阳性），病毒性肺炎（28例，血清病毒特异性IgM抗体均为阳性）。同时选取正常体检儿童25例作为对照组。四组患儿一般情况比较，差异无统计学意义（P>0.05）。具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 T淋巴细胞亚群的测定 采集入组患儿清晨空腹外周肘静脉血2mL，分离、采取外周血单个核细胞，并用尼龙棉柱分离出T淋巴细胞，用Coulter公司的流式细胞仪检测。
1.2.2 超敏c反应蛋白（C reactive protein，hs-CRP）检测 hs-CRP检测的相关试剂均来自于购自西门子医学诊断产品有限公司。采用免疫散射比浊法。
1.2.3 无激素活性的降钙素前肽物质（procalcitonin，PCT）检测 采用酶联荧光法检测PCT，仪器配套试剂于mini-VIDAS分析仪上进行，PCT>0.5μg/L则为阳性。
1.3 观察指标
观察各组外周血hs-CRP、PCT变化，并对各组外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+Treg水平进行比较。
1.4 统计学方法
统计软件采用SPSS17.0，计量资料采用t检验或F检验，计数资料用x2检验，检验水准α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组外周血hs-CRP比较
细菌性肺炎及支原体肺炎患儿的外周血hs-CRP水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。病毒性肺炎组患儿外周血hs-CRP水平与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.2 各组外周血PCT检测结果比较
细菌性肺炎患儿的PCT水平及阳性数显著高于其他三组，差异有统计学意义（P<0.05）。支原体肺炎及病毒性肺炎患儿的PCT与对照组比较，差异无统计学意义。见表2。
2.3 各组外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+Treg水平比较
细菌性肺炎、支原体肺炎、病毒性肺炎的CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+ Treg与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。细菌性肺炎组、支原体肺炎组的CD8+与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。
3 讨论
小儿肺炎临床高发，发病时间北方为 冬、春季，南方则为夏、秋季[6-7]。其病因主要为呼吸道合胞病毒或肺炎支原体感染，患儿一旦发病，其正常的免疫平衡被打破，CD4+/CD8+的比值出现失衡状态，将导致机体出现一系列免疫系统反应[8-9]。
研究显示，在细菌感染时机体的hs-CRP水平显著升高，而支原体、病毒感染时，hs-CRP水平表现为正常或轻度的升高[10-11]，其具有较高的特异性和敏感性，因此临床把hs-CRP水平作为诊断、鉴别细菌感染的可靠指标。CD4+CD25+调节性T细胞可以分泌多种抑制性细胞因子，如IL-4、IL-10或TGF-β等，但其是否通过可溶性细胞因子发挥作用有多种不同的实验结果[12-13]。实验发现用IL-4、IL-10或TGF-B的中和抗体不能逆转CD4+CD25+调节性T细胞抑制效应，来源于IL-4-或IL-10-/小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞在体内仍然具有完全的免疫抑制作用[14-15]。
本研究中，细菌性肺炎及支原体肺炎患儿外周血hs-CRP水平明显高于对照组（P<0.05）。病毒性肺炎组患儿外周血hs-CRP水平与对照组比较，差异无统计学意义。细菌性肺炎患儿PCT水平及阳性数显著高于其他三组（P<0.05）。支原体肺炎及病毒性肺炎患儿PCT与对照组比较，差异无统计学意义。说明hs-CRP是一项非常敏感的炎症标志物，但缺乏特异性，PCT水平可作为鉴别细菌性肺炎与支原体肺炎的指标。
本研究中，细菌性肺炎、支原体肺炎、病毒性肺炎CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。细菌性肺炎组、支原体肺炎组CD8+与对照组比较，差异皆有统计学意义（P<0.05）。说明T细胞免疫抑制作用可以激活体内大量病原微生物的存活与复制，通过CD4+CD25+Treg细胞的活化作用而作用于效应T细胞来抑制机体免疫反应，以避免机体过度免疫应答所产生的病理损害，从而维持机体的慢性感染状态。
[参考文献]
[1] 胡亚美，江载芳，诸福棠.实用儿科学[M].第7版.北京：人民卫生出版社，2002：821-825.
[2] 刘清泉.CD4+CD25+调节性T细胞和感染免疫[J].医学研究生报，2006，19（8）：741-743.
[3] Wu HY，Maron R，Tukpah AM，et al.Mucosal anti-CD3 monoclonal antibody attenuates collagen-induced arthritis that is associated with induction of LAP+ regulatory T cells and is enhanced by administration of an emulsome-based Th2-skewing adjuvant？[J].Immunol，2010，185（6）：3401-3407. [4] 严敦煌.支气管肺炎患儿治疗前后血清SOD、CGRP和T淋巴细胞亚群检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2006，19（6）：465-466.
[5] Venet F，Pachot A，Debard AL，et al.Human CD4+CD25+regulatory T lymphoeytes inhibit lipopolysaccharideinduced monocyte survival through a Fas/Fas ligand-dependent mechanism[J].J Immunol，2006，177（9）：6540-6547.
[6] 李超，袁宝军.CD4+CD25+调节性T细胞在呼吸系统疾病中的作用[J].中国老年学杂志，2012，32（5）：1085-1088.
[7] Wan Q，Kozhaya L，Imberg K，et al.Probing the effector and suppressive functions of human T cell subsets using antigen-specific engineered T cell receptors[J].PLoS One，2013，8（2）：287-293.
[8] Braitch M，Harikrishnan S，Robins RA，et al.Glucocorticoids increase CD4+CD25+cell percentage and Foxp3 expression in patients with multiple sclerosis[J].Acta Neurol Scand，2009，119（25）：239-245.
[9] Nakagirit J，Inoue M，Motii E，et al.Local IL-17 production and a decrease in peripheral blood regulatory T cells in an animal model of bronchiolitis obliterans[J].Transplatation，2010，89（11）：1312-1319.
[10] 黄花荣，刘甜甜，魏菁，等.哮喘患儿外周血 CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系[J].中华临床医师杂志（电子版），2009，3（3）：355-361.
[11] 张秀秀，曲书强.毛细支气管炎发病中细胞因子作用的研究进展[J].国际免疫学杂志，2011，34（6）：365-367.
[12] 鞠云飞，孙立锋，胡华，等.甲泼尼龙对哮喘患儿外周血 CD4+CD25+调节性T细胞影响的体外研究[J].中国临床药理学杂志，2011，27（11）：830-832.
[13] 郭智兰.CD4+CD25high+CD127lowTreg细胞在细支气管炎患儿外周血中的表达及意义[D].郑州：郑州大学，2013：23-25.
[14] 毛静芳.RSV毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞与Th17细胞功能变化及意义[J].中国医药指南，2012，10（17）：541-542.
[15] 郑晓莉，薛丽华.肺炎患儿外周血超敏C反应蛋白、降钙素原及细胞免疫指标变化及意义[J].临床儿科杂志，2013，31（1）：22-25.
（收稿日期：2015-06-03）