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摘 要：目的 建立超高效液相色谱串联质谱法检测蔬菜水果中涕灭威及其代谢产物残留含量的分析方法。
方法 试样中的涕灭威及其代谢产物经乙腈提取，提取液经过滤、浓缩后，采用固相萃取分离、净化，淋洗液经浓缩后，使用安捷伦C18（2.1×50mm，1.8μm）色谱柱分离，以5mM甲酸铵+0.1%甲酸水溶液—0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱，采用多反应监测正离子模式检测。外标法定量。
结果 在10ug/L-400ug/L范围内线性关系良好，相关系数在0.999以上，在5、10、50ug/L加标水平的回收率为76.8%—97.9%，相对标准偏差为：0.13%—0.87%。
结论 该方法净化效果好，灵敏度高，适于测定蔬菜水果中涕灭威及其代谢产物的残留。
关键词：涕灭威;涕灭威砜;涕灭威亚砜;超高效液相色谱—质谱联用法;
涕灭威属于甲基氨基甲酸肟酯类农药，是一种广谱杀虫剂，急性毒性极高。涕灭威易残留在自然水体、土壤等介质中，对鱼类和水生动物毒性大，进入人体后能够抑制胆碱酯酶，并且与其结合后不可逆，对人体有较大危害，属于高毒农药。涕灭威施用后能够很快氧化成为仍具生物活性的涕灭威亚砜和涕灭威砜。
目前对于蔬菜水果中涕灭威及其代谢产物的检测主要使用液相色谱法NY/T761-2008，液相色谱串联质谱法GB/T20769-2008，本文改进了前处理方法，优化建立了超高效液相色谱—质谱联用仪检测涕灭威及其代谢产物的方法。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1290/6470超高效液相色谱-质谱联用仪[配电喷雾离子源（ESI），美国Agilent公司];氮吹浓缩仪（杭州奥盛仪器有限公司）;匀浆机（德国IKA公司）。
涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜标准物质（北京坛墨质检科技有限公司），甲酸、甲酸铵（美国飞世尔公司），乙腈、甲醇、二氯甲烷（德国默克公司），氯化钠（西陇科学股份有限公司），纯净水（屈臣氏），氨基固相萃取柱（500mg，6mL，天津博纳艾杰尔公司）。
1.2 实验方法
1.2.1 标准溶液的配制
分别将安瓿瓶中100μg/mL的15种标准液用甲醇混合配制成10μg/mL的储
备标准液。将储备标准液用甲醇稀释得到10、20、40、60、100、200、400ng/mL浓度点。
1.2.2样品前处理
（1）提取：准确称取20.0g试样放入匀浆机中，加入40.0mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5g-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，收集滤液40mL-50mL，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30min，使乙腈和水相分层。
（2）净化：吸取10mL乙腈提取液，放入烧杯中，70℃水浴氮吹近干，加入2mL甲醇+二氯甲烷（5+95）溶解残渣。将氨基柱用4.0mL甲醇+二氯甲烷活化，当溶液到达吸附层表面时，立即将上述浓缩液加至柱中，并用刻度试管接洗脱液，用上述混合液2 m L洗涤2次，收集全部淋洗液。将收集的洗脱液在50℃水浴氮吹至近干，用甲醇准确定容至2 m L，过0.22μm膜，待测。
1.2.3色谱条件
色谱柱：安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18（2.1×50mm 1.8μm）;柱温：40℃;流速：0.4mL/min;进样量：2μL;流动相：A：5mM甲酸铵加0.1%甲酸水溶液，B：0.1%甲酸乙腈。
1.2.4质谱条件
离子化模式：ESI+;干燥器温度：140℃;干燥气流速：5L/min;雾化器压力：30psi;鞘气温度：375℃;鞘气流速：12L/min;毛细管电压：4000V;喷嘴电压：0V;扫描类型：MRM;Delta EMV：200V。
2 结果与讨论
2.1质谱条件的优化
本研究分别将浓度为1mg/L的3種化合物标准溶液用仪器自带的优化方法优化，优化出的母离子和子离子及相关电压值见表1。
2.2 色谱条件的优化
本研究通过梯度洗脱使得3种化合物在色谱柱上有较好的分离，峰型较好。洗脱梯度为：A相：保持95%，0～2min;A相：95%～60%，2～5min;A相：60%～95%，5～5.1min;A相：保持95%，5.1～8min。
2.3 线性范围、回收率、精密度
以峰面积为纵坐标、质量浓度为横坐标作曲线。实验结果表明，3种农药在10—400ug/L范围内线性良好，分别为：涕灭威0.9997，涕灭威砜0.9995，涕灭威亚砜0.9997。选取卷心菜和橙子为基质加标，低中高3个浓度加标回收率在76.8%—97.9%之间，相对标准偏差在0.13%—1.6%之间。
3 结论
本研究参照国家标准《NY/T 761-2008》前处理方法，建立了超高效液相色谱—质谱联用法测定蔬菜水果中涕灭威及其代谢物残留的方法。该方法具有操作简单、快速、灵敏度高等特点，适用于大批蔬菜水果中3种农药残留的同时检测。
作者简介：起萌，（1991.11-），女，彝族，云南省楚雄州，学历：本科，职称：助理农艺师，毕业院校：北京林业大学，研究方向：农产品中农兽药残留检测
方法 试样中的涕灭威及其代谢产物经乙腈提取，提取液经过滤、浓缩后，采用固相萃取分离、净化，淋洗液经浓缩后，使用安捷伦C18（2.1×50mm，1.8μm）色谱柱分离，以5mM甲酸铵+0.1%甲酸水溶液—0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱，采用多反应监测正离子模式检测。外标法定量。
结果 在10ug/L-400ug/L范围内线性关系良好，相关系数在0.999以上，在5、10、50ug/L加标水平的回收率为76.8%—97.9%，相对标准偏差为：0.13%—0.87%。
结论 该方法净化效果好，灵敏度高，适于测定蔬菜水果中涕灭威及其代谢产物的残留。
关键词：涕灭威;涕灭威砜;涕灭威亚砜;超高效液相色谱—质谱联用法;
涕灭威属于甲基氨基甲酸肟酯类农药，是一种广谱杀虫剂，急性毒性极高。涕灭威易残留在自然水体、土壤等介质中，对鱼类和水生动物毒性大，进入人体后能够抑制胆碱酯酶，并且与其结合后不可逆，对人体有较大危害，属于高毒农药。涕灭威施用后能够很快氧化成为仍具生物活性的涕灭威亚砜和涕灭威砜。
目前对于蔬菜水果中涕灭威及其代谢产物的检测主要使用液相色谱法NY/T761-2008，液相色谱串联质谱法GB/T20769-2008，本文改进了前处理方法，优化建立了超高效液相色谱—质谱联用仪检测涕灭威及其代谢产物的方法。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1290/6470超高效液相色谱-质谱联用仪[配电喷雾离子源（ESI），美国Agilent公司];氮吹浓缩仪（杭州奥盛仪器有限公司）;匀浆机（德国IKA公司）。
涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜标准物质（北京坛墨质检科技有限公司），甲酸、甲酸铵（美国飞世尔公司），乙腈、甲醇、二氯甲烷（德国默克公司），氯化钠（西陇科学股份有限公司），纯净水（屈臣氏），氨基固相萃取柱（500mg，6mL，天津博纳艾杰尔公司）。
1.2 实验方法
1.2.1 标准溶液的配制
分别将安瓿瓶中100μg/mL的15种标准液用甲醇混合配制成10μg/mL的储
备标准液。将储备标准液用甲醇稀释得到10、20、40、60、100、200、400ng/mL浓度点。
1.2.2样品前处理
（1）提取：准确称取20.0g试样放入匀浆机中，加入40.0mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5g-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，收集滤液40mL-50mL，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30min，使乙腈和水相分层。
（2）净化：吸取10mL乙腈提取液，放入烧杯中，70℃水浴氮吹近干，加入2mL甲醇+二氯甲烷（5+95）溶解残渣。将氨基柱用4.0mL甲醇+二氯甲烷活化，当溶液到达吸附层表面时，立即将上述浓缩液加至柱中，并用刻度试管接洗脱液，用上述混合液2 m L洗涤2次，收集全部淋洗液。将收集的洗脱液在50℃水浴氮吹至近干，用甲醇准确定容至2 m L，过0.22μm膜，待测。
1.2.3色谱条件
色谱柱：安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18（2.1×50mm 1.8μm）;柱温：40℃;流速：0.4mL/min;进样量：2μL;流动相：A：5mM甲酸铵加0.1%甲酸水溶液，B：0.1%甲酸乙腈。
1.2.4质谱条件
离子化模式：ESI+;干燥器温度：140℃;干燥气流速：5L/min;雾化器压力：30psi;鞘气温度：375℃;鞘气流速：12L/min;毛细管电压：4000V;喷嘴电压：0V;扫描类型：MRM;Delta EMV：200V。
2 结果与讨论
2.1质谱条件的优化
本研究分别将浓度为1mg/L的3種化合物标准溶液用仪器自带的优化方法优化，优化出的母离子和子离子及相关电压值见表1。
2.2 色谱条件的优化
本研究通过梯度洗脱使得3种化合物在色谱柱上有较好的分离，峰型较好。洗脱梯度为：A相：保持95%，0～2min;A相：95%～60%，2～5min;A相：60%～95%，5～5.1min;A相：保持95%，5.1～8min。
2.3 线性范围、回收率、精密度
以峰面积为纵坐标、质量浓度为横坐标作曲线。实验结果表明，3种农药在10—400ug/L范围内线性良好，分别为：涕灭威0.9997，涕灭威砜0.9995，涕灭威亚砜0.9997。选取卷心菜和橙子为基质加标，低中高3个浓度加标回收率在76.8%—97.9%之间，相对标准偏差在0.13%—1.6%之间。
3 结论
本研究参照国家标准《NY/T 761-2008》前处理方法，建立了超高效液相色谱—质谱联用法测定蔬菜水果中涕灭威及其代谢物残留的方法。该方法具有操作简单、快速、灵敏度高等特点，适用于大批蔬菜水果中3种农药残留的同时检测。
作者简介：起萌，（1991.11-），女，彝族，云南省楚雄州，学历：本科，职称：助理农艺师，毕业院校：北京林业大学，研究方向：农产品中农兽药残留检测