【摘 要】
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[目的]建立定量检测 SS2粘附因子mRNA转录水平的荧光定量 PCR方法。[方法]根据已报导的 SS2相关粘附因子（包括 MRP、FBPS、CPS2J）及管家基因 aroA，以 GenBank登录的核苷酸序列，设
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[目的]建立定量检测 SS2粘附因子mRNA转录水平的荧光定量 PCR方法。[方法]根据已报导的 SS2相关粘附因子（包括 MRP、FBPS、CPS2J）及管家基因 aroA，以 GenBank登录的核苷酸序列，设计特异性引物，利用 RT-PCR扩增和克隆各粘附因子的核苷酸片段，构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性模板，建立检测各粘附因子的 SYBR Green Ⅰ荧光定量 PCR方法。[结果]利用优化的 Real-time PCR 体系建立了各粘附因子和aroA的扩增曲线、标准曲线和溶解曲线。标准曲线表明，起始模板数与 Ct值之间线性关系好，相关系数 R2均达0.995以上。此方法特异性好，扩增产物形成单一的特异性熔解峰；敏感性高，初始模板的检出下限达1.0×102拷贝数/μl；重复性好，组内变异系数均小于2%。[结论]该研究为在分子水平上探究不同 SS2菌株对细胞粘附差异的机制提供了技术手段。
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