【摘 要】
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细胞色素P450单加氧酶(Cytochrome P450 monooxygenases)是一种广谱催化剂,可以催化多种类型反应而参与生物体外源物质代谢与天然产物的合成.为丰富P450作为合成生物学的酶元
【机 构】
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江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122
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细胞色素P450单加氧酶(Cytochrome P450 monooxygenases)是一种广谱催化剂,可以催化多种类型反应而参与生物体外源物质代谢与天然产物的合成.为丰富P450作为合成生物学的酶元件库,并探索新型催化反应,利用生物信息学手段从争论贪噬菌Variovorax paradoxus S110中挖掘出一种新型电子自供体细胞色素P450VpMO单加氧酶,属于CYP116B家族,它可以在大肠杆菌Escherichia coli异源可溶表达.酶学性质研究表明P450VpMO最适pH和最适温度分别为8.0和45℃,并且在温度低于35℃时具有良好的稳定性,Km值为0.458 mmol/L,Kcat为2.438 min-1;重要的是重组P450VpMO可以催化一系列包含污染物的含甲氧基底物进行脱甲基反应,其中对4-甲氧基苯乙酮的脱甲基反应转化率高达91％.相比于其他CYP 116B家族的P450酶,P450VpMO表现出较强的酶活性,这为后期进一步研究P450VpMO提供了基础.
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