【摘 要】
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目的构建携带有人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白邸基因的重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中进行包装。方法将邸基因克隆至穿梭质粒Track-CMV,构建重组质粒Track-CMV/gB,亚克隆至转移载体pA
【机 构】
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兰州生物制品研究所,中国科学院兰州近代物理研究所,兰州大学
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目的构建携带有人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白邸基因的重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中进行包装。方法将邸基因克隆至穿梭质粒Track-CMV,构建重组质粒Track-CMV/gB,亚克隆至转移载体pAD-Easy-1,构建重组质粒pAD-Easy-1/邸,将该重组骨架质粒转染HEK293细胞,利用HEK293细胞产生重组腺病毒。空斑法及PCR法挑选重组病毒,荧光显微镜观察标志蛋白(绿色荧光蛋白)的表达,利用噬斑法检测病毒滴度。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确,转染重组腺病毒载体的HEK293细
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