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【摘要】 目的 探讨血清胱抑素 C(Cys C)在诊断慢性肾脏病(CKD)的意义,以及Cys C与MDRD方程估计肾小球滤过率(GFR)的准确性及相关性。方法 根据MDRD方程7计算的肾小球滤过率(GFR)将CKD患者分为5期,ELISA法检测CKD患者的Cys C的水平,观察Cys C与血肌酐(Scr)、GFR的相关性。结果 Cys C与Scr呈正相关,与GFR呈负相关;在肾功能轻度损伤时,Cys C反映肾功能恶化程度的敏感度较Scr高。结论 ELISA法能够检测Cys C的水平,Cys C能够作为反映肾功能的可靠指标,并且是肾功能的早期诊断指标。CKD2 5期,Cys C与MDRD方程7有良好的相关性;Cys C与MDRD方程7能够作为CKD2 5期患者估计GFR的指标。
【关键词】慢性肾脏病;肾小球滤过率;胱抑素C;MDRD方程
Clinical diognostic value of serum Cystatin C and MDRD equation for chronic kidney disease
LIU Jun ping,ZHANG Li ping,LI Peng hua.Fenyang Hospital Shanxi Province,Fenyang 032200,China
【Abstract】 Objective To study the clinical value of Cys C and MDRD equation in the patient with CKD.GFR was estimated by Cys C and MDRD equation.To study the correlation between Cys C and MDRD equation.Methods According to the value of GFR of the patient with CKD,divided them into five groups.To study the correlation between Cys C and GFR.To explore the correlation between Cys C and Sc.Results Cys C was correlated with Scr.There was negative correlation between Cys C and GFR.When renal function slightly injured,Cys C was higher sensitivity than Scr.Conclusion It is reliable to detect Cys C by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).It is dependable to judge renal function by the level of Cys C.Cys C can be a sensitive marker to reflect GFR.GFR was estimated by Cys C and MDRD equation.It was correlation between Cys C and MDRD equation.
【Key words】Chronic kidney disease(CKD); Glomerular filtration rate(GFR); Cystatin C(Cys C); MDRD equation
临床工作中常用血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清肌酐清除率(Ccr)评价肾小球的滤过功能。Scr、BUN受很多肾内和肾外因素干扰,而Ccr是一种估计的肾小球滤过率(GFR),受肌肉容积和肾小管排泌等因素的影响,反应的GFR或低或高。因此,需要一种更能精确反应GFR的指标。血清胱抑素(Cys C)是半胱氨酸蛋白酶的抑制剂,分子量为13.3KDa,由机体所有有核细胞产生,Cys C经肾小球自由滤过,肾小管不分泌,在近曲小管被重新吸收并被降解,它的这些特性与内源性GFR指标的要求很相近,是近年来发现的一种很好地反映GFR的指标。本研究探讨Cys C在慢性肾脏病(CKD)肾功能损害中的临床价值,为临床提供一个简便、敏感地反映GFR的理想指标。
1 资料和方法
1.1 一般资料 我们抽取我科2008年3月至2009年5月确诊的肾内科CKD患者79名,男36例,女43例,年龄为19~82岁,根据美国NKF K/DOQI制订的指南[1]。把入选的CKD患者根据GFR水平分为5期:1期:GFR≥90 ml/(min•1.73 m2);2期:GFR:60~89 ml/(min•1.73 m2);3期:GFR:30~59 ml/(min•1.73 m2);4期:GFR:15~29 ml/min/1.73 m2;5期:GFR<15 ml/(min•1.73 m2)(或透析)。因为CKD2期的患者比较少,所以CKD2期和3期的患者一起分析。另取同期健康体检者40名作为对照组,男15例,女25例,年龄为25~60岁。
1.2 仪器和试剂 血清肌酐测定采用全自动生化仪,血清Cys C由北京中山公司提供,酶标仪,70℃温箱。
1.3 方法 Scr测定采用酶法,正常值范围44~132 μmol/L,血清Cys C测定采用ELISA法,正常值范围为0.6~1.7 μg/ml,购自北京中山药剂厂,操作步骤按说明书进行;连续检测3次,取它们的均值作为结果。
1.4 统计学方法 各组数据以表示,经正态检验与方差齐性检验组间比较采用单因素方差分析,各组间两两比较采用SNK法;符合正态分布的采用直线相关分析;定a=0.05为显著性检验水准,取双侧P值。所有统计分析均采用 SPSS13.0统计软件;MDRD方程7估计eGFR,使用软件计算。
2 结果
表1
各组血清eGFR、Cys C、Scr的表达
组别例数eGFR(ml/min.1.73 m2)Cys C(μg/ml)Scr(μmol/L)BUN(mmol/L)ALB(mg/L)
对照组40118.43±12.300.21±0.0149.10±5.924.33±0.3340.25±2.71
CKD1期17109.82±10.170.43±0.0361.80±10.393.9±0.6238.50±3.14
CKD2 3期2653.28±12.851.80±0.58*113.79±20.74*6.06±1.1032.41±7.84
CKD4期1422.86±4.673.21±0.51*#251.31±60.80*#13.10±3.18*#32.38±5.63*
CKD5期227.63±2.087.63±1.14*#※703.77±110.57*#※26.36±5.08*#※28.70±4.86*
F值126.094139.91143.5745.965
P值0.0000.0000.0000.001
注:*与对照组比较,P=0.000 ; #与CKD2 3期比较,P=0.000;※与CKD4期比较,P=0.000
表2
各组血清Cys C与eGFR的相关性分析
组别例数r值方程F值P值
CKD1期17 0.280—1.2720.277
CKD2 3期26 0.822y=80.620 18.253x50.010.000
CKD4期14 0.898y=5.464 0.099x19.0060.000
CKD5期22 0.795y=11.628 0.529x34.4580.009
表3
各组血清Cys C与Scr的相关性分析
组别例数r值方程F值P值
CKD1期170.518Y=0.02x+0.2325.5150.033
CKD2 3期260.519Y=0.015x+0.2068.8650.007
CKD4期140.692Y=0.005x+2.06111.020.006
CKD5期220.662Y=0.007x+2.49015.5800.001
表4
各组血清eGFR、Cys C、Scr结果的灵敏度
组别例数eGFR(ml/min)Cys C(μg/mL)Scr(μmol/L)BUN(mmol/L)
CKD1期1717/17(100%)1/17(5.88%)0/17(0%)0/17(0%)
CKD2、3期2626/26(100%)10/26(42.31%)4/26(15.36%)5/26(19.23%)
CKD4期1414/14(100%)14/14(100%)14/14(100%)14/14(100%)
CKD5期2222/22(100%)22/22(100%)22/22(100%)22/22(100%)
3 讨论
长期以来,人们一直用血肌酐(Scr)作为评价肾功能的指标,由于Scr受内外环境的影响,人们一直寻找一种新的标志物,能更精确地反应肾功能的变化。1985年,Grubb等首先报道半胱氨酸蛋白酶抑制剂 后来被命名为胱抑素 C(Cys C)的物质与GFR密切相关,能够作为肾小球滤过功能的指标[2]。
近年来,提出很多估算GFR的方程,有Crockroft Galt公式计算的肌酐清除率(Ccr)来估计GFR,但是它必须收集24 h尿量,而且没有考虑血白蛋白等因素的影响,因此,计算的GFR准确性差。近年来发现MDRD方程7估计的GFR更加精确[3]。我们使用MDRD方程7的软件计算出患者的eGFR,与Cys C及Scr比较,观察其准确性及相关性。
本实验通过MDRD方程7计算的GFR对所选CKD患者进行分组,与ELSIA方法所测的Cys C值进行相关分析,结果发现Cys C随Scr的增高而增高,与Scr值有正相关关系(相关系数分别为0.518、0.519、0.692、0.662,P<0.05),而与GFR成负相关关系(在CKD2~5期,相关系数分别为0822,0.898,0.795,P<0.001),说明Cys C能够准确反应患者肾功能的状态,为临床医师提供准确信息;同时,我们发现在CKD1期,Cys C与GFR没有相关性,可能是因为样本量小,也可能是因为我们是根据MDRD方程7计算GFR,而MDRD方程7考虑了人种与血清白蛋白等因素,在肾功能损伤接近正常的患者,其准确性较差[4],其精确性还有待于进一步加大样本量后验证。
既往的文献[5]Cys C的测定都是使用免疫比浊法,我们首次使用ELISA法测定Cys C,也获得了满意的结果,说明能够使用ELISA法测定Cys C。
从表4可以看出:CKD1期,有1例患者的Cys C值大于正常值范围,敏感度为5.88%,而从血肌酐值观察,则全部在正常值范围;在CKD2~3期,Cys C的敏感度为42.31%,血肌酐的敏感度为15.36%。由此看出,在肾功能轻度损伤时Cys C能够比Scr更为敏感地反映肾功能的恶化程度,是肾功能的早期诊断指标。
综上所述,ELISA法能够准确地检测Cys C,Cys C能够作为反映GFR的理想指标,而且是肾功能的早期诊断指标,我们期待Cys C能够早日广泛应用于临床工作,更好地服务于患者。
参考文献
[1] National Kidney Foundation.K/DOQI Clinical practical guidelines for chronic kidney disease:evalution classification,and stratification.Am J Kidney Dis,2002,39(Suppl):S1 S266.
[2] Grubb A,Simonsen O,Sturfelt G,et al.Serum concentration of Cystatinc factor D and β2 micro globulin as a measure of glomerular filtration rate.Acta Med Scand,1985,218(3):499 503.
[3] 马迎春,左力,王梅,等.肌酐清除率和MDRD方程评估肾小球滤过率的比较.临床内科杂志,2006,23(1):35.
[4] 王梅.牛津临床透析手册.人民卫生出版社,2006:17.
[5] 张培培,刘志红,谢红浪,等.胱抑素 C测定在糖尿病肾病肾功能评价中的应用.肾脏病与透析移植杂志,2007,16(6):502.
【关键词】慢性肾脏病;肾小球滤过率;胱抑素C;MDRD方程
Clinical diognostic value of serum Cystatin C and MDRD equation for chronic kidney disease
LIU Jun ping,ZHANG Li ping,LI Peng hua.Fenyang Hospital Shanxi Province,Fenyang 032200,China
【Abstract】 Objective To study the clinical value of Cys C and MDRD equation in the patient with CKD.GFR was estimated by Cys C and MDRD equation.To study the correlation between Cys C and MDRD equation.Methods According to the value of GFR of the patient with CKD,divided them into five groups.To study the correlation between Cys C and GFR.To explore the correlation between Cys C and Sc.Results Cys C was correlated with Scr.There was negative correlation between Cys C and GFR.When renal function slightly injured,Cys C was higher sensitivity than Scr.Conclusion It is reliable to detect Cys C by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).It is dependable to judge renal function by the level of Cys C.Cys C can be a sensitive marker to reflect GFR.GFR was estimated by Cys C and MDRD equation.It was correlation between Cys C and MDRD equation.
【Key words】Chronic kidney disease(CKD); Glomerular filtration rate(GFR); Cystatin C(Cys C); MDRD equation
临床工作中常用血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清肌酐清除率(Ccr)评价肾小球的滤过功能。Scr、BUN受很多肾内和肾外因素干扰,而Ccr是一种估计的肾小球滤过率(GFR),受肌肉容积和肾小管排泌等因素的影响,反应的GFR或低或高。因此,需要一种更能精确反应GFR的指标。血清胱抑素(Cys C)是半胱氨酸蛋白酶的抑制剂,分子量为13.3KDa,由机体所有有核细胞产生,Cys C经肾小球自由滤过,肾小管不分泌,在近曲小管被重新吸收并被降解,它的这些特性与内源性GFR指标的要求很相近,是近年来发现的一种很好地反映GFR的指标。本研究探讨Cys C在慢性肾脏病(CKD)肾功能损害中的临床价值,为临床提供一个简便、敏感地反映GFR的理想指标。
1 资料和方法
1.1 一般资料 我们抽取我科2008年3月至2009年5月确诊的肾内科CKD患者79名,男36例,女43例,年龄为19~82岁,根据美国NKF K/DOQI制订的指南[1]。把入选的CKD患者根据GFR水平分为5期:1期:GFR≥90 ml/(min•1.73 m2);2期:GFR:60~89 ml/(min•1.73 m2);3期:GFR:30~59 ml/(min•1.73 m2);4期:GFR:15~29 ml/min/1.73 m2;5期:GFR<15 ml/(min•1.73 m2)(或透析)。因为CKD2期的患者比较少,所以CKD2期和3期的患者一起分析。另取同期健康体检者40名作为对照组,男15例,女25例,年龄为25~60岁。
1.2 仪器和试剂 血清肌酐测定采用全自动生化仪,血清Cys C由北京中山公司提供,酶标仪,70℃温箱。
1.3 方法 Scr测定采用酶法,正常值范围44~132 μmol/L,血清Cys C测定采用ELISA法,正常值范围为0.6~1.7 μg/ml,购自北京中山药剂厂,操作步骤按说明书进行;连续检测3次,取它们的均值作为结果。
1.4 统计学方法 各组数据以表示,经正态检验与方差齐性检验组间比较采用单因素方差分析,各组间两两比较采用SNK法;符合正态分布的采用直线相关分析;定a=0.05为显著性检验水准,取双侧P值。所有统计分析均采用 SPSS13.0统计软件;MDRD方程7估计eGFR,使用软件计算。
2 结果
表1
各组血清eGFR、Cys C、Scr的表达
组别例数eGFR(ml/min.1.73 m2)Cys C(μg/ml)Scr(μmol/L)BUN(mmol/L)ALB(mg/L)
对照组40118.43±12.300.21±0.0149.10±5.924.33±0.3340.25±2.71
CKD1期17109.82±10.170.43±0.0361.80±10.393.9±0.6238.50±3.14
CKD2 3期2653.28±12.851.80±0.58*113.79±20.74*6.06±1.1032.41±7.84
CKD4期1422.86±4.673.21±0.51*#251.31±60.80*#13.10±3.18*#32.38±5.63*
CKD5期227.63±2.087.63±1.14*#※703.77±110.57*#※26.36±5.08*#※28.70±4.86*
F值126.094139.91143.5745.965
P值0.0000.0000.0000.001
注:*与对照组比较,P=0.000 ; #与CKD2 3期比较,P=0.000;※与CKD4期比较,P=0.000
表2
各组血清Cys C与eGFR的相关性分析
组别例数r值方程F值P值
CKD1期17 0.280—1.2720.277
CKD2 3期26 0.822y=80.620 18.253x50.010.000
CKD4期14 0.898y=5.464 0.099x19.0060.000
CKD5期22 0.795y=11.628 0.529x34.4580.009
表3
各组血清Cys C与Scr的相关性分析
组别例数r值方程F值P值
CKD1期170.518Y=0.02x+0.2325.5150.033
CKD2 3期260.519Y=0.015x+0.2068.8650.007
CKD4期140.692Y=0.005x+2.06111.020.006
CKD5期220.662Y=0.007x+2.49015.5800.001
表4
各组血清eGFR、Cys C、Scr结果的灵敏度
组别例数eGFR(ml/min)Cys C(μg/mL)Scr(μmol/L)BUN(mmol/L)
CKD1期1717/17(100%)1/17(5.88%)0/17(0%)0/17(0%)
CKD2、3期2626/26(100%)10/26(42.31%)4/26(15.36%)5/26(19.23%)
CKD4期1414/14(100%)14/14(100%)14/14(100%)14/14(100%)
CKD5期2222/22(100%)22/22(100%)22/22(100%)22/22(100%)
3 讨论
长期以来,人们一直用血肌酐(Scr)作为评价肾功能的指标,由于Scr受内外环境的影响,人们一直寻找一种新的标志物,能更精确地反应肾功能的变化。1985年,Grubb等首先报道半胱氨酸蛋白酶抑制剂 后来被命名为胱抑素 C(Cys C)的物质与GFR密切相关,能够作为肾小球滤过功能的指标[2]。
近年来,提出很多估算GFR的方程,有Crockroft Galt公式计算的肌酐清除率(Ccr)来估计GFR,但是它必须收集24 h尿量,而且没有考虑血白蛋白等因素的影响,因此,计算的GFR准确性差。近年来发现MDRD方程7估计的GFR更加精确[3]。我们使用MDRD方程7的软件计算出患者的eGFR,与Cys C及Scr比较,观察其准确性及相关性。
本实验通过MDRD方程7计算的GFR对所选CKD患者进行分组,与ELSIA方法所测的Cys C值进行相关分析,结果发现Cys C随Scr的增高而增高,与Scr值有正相关关系(相关系数分别为0.518、0.519、0.692、0.662,P<0.05),而与GFR成负相关关系(在CKD2~5期,相关系数分别为0822,0.898,0.795,P<0.001),说明Cys C能够准确反应患者肾功能的状态,为临床医师提供准确信息;同时,我们发现在CKD1期,Cys C与GFR没有相关性,可能是因为样本量小,也可能是因为我们是根据MDRD方程7计算GFR,而MDRD方程7考虑了人种与血清白蛋白等因素,在肾功能损伤接近正常的患者,其准确性较差[4],其精确性还有待于进一步加大样本量后验证。
既往的文献[5]Cys C的测定都是使用免疫比浊法,我们首次使用ELISA法测定Cys C,也获得了满意的结果,说明能够使用ELISA法测定Cys C。
从表4可以看出:CKD1期,有1例患者的Cys C值大于正常值范围,敏感度为5.88%,而从血肌酐值观察,则全部在正常值范围;在CKD2~3期,Cys C的敏感度为42.31%,血肌酐的敏感度为15.36%。由此看出,在肾功能轻度损伤时Cys C能够比Scr更为敏感地反映肾功能的恶化程度,是肾功能的早期诊断指标。
综上所述,ELISA法能够准确地检测Cys C,Cys C能够作为反映GFR的理想指标,而且是肾功能的早期诊断指标,我们期待Cys C能够早日广泛应用于临床工作,更好地服务于患者。
参考文献
[1] National Kidney Foundation.K/DOQI Clinical practical guidelines for chronic kidney disease:evalution classification,and stratification.Am J Kidney Dis,2002,39(Suppl):S1 S266.
[2] Grubb A,Simonsen O,Sturfelt G,et al.Serum concentration of Cystatinc factor D and β2 micro globulin as a measure of glomerular filtration rate.Acta Med Scand,1985,218(3):499 503.
[3] 马迎春,左力,王梅,等.肌酐清除率和MDRD方程评估肾小球滤过率的比较.临床内科杂志,2006,23(1):35.
[4] 王梅.牛津临床透析手册.人民卫生出版社,2006:17.
[5] 张培培,刘志红,谢红浪,等.胱抑素 C测定在糖尿病肾病肾功能评价中的应用.肾脏病与透析移植杂志,2007,16(6):502.