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目的
观察感染HBV的PBMC经人绒毛膜癌滋养层细胞(Bewo细胞)构建的胎盘屏障迁移情况，探讨PBMC作为载体转运HBV的生物学作用。
方法培养并用细胞计数试剂盒-8检测培养Bewo细胞和PBMC的增殖和活性。用HBV DNA含量为5×106拷贝/mL的乙型肝炎患者血清100 μL感染PBMC后，用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光染料标记感染的细胞，transwell小室建立Bewo细胞和感染HBV的PBMC共培养模型。用流式细胞仪检测感染HBV的PBMC迁移情况，荧光定量PCR法检测transwell下室中PBMC HBV DNA含量。
结果PBMC、Bewo细胞均在接种24 h左右开始增殖，120 h左右开始进入生长停滞期。transwell小室共培养0、12、24和48 h，下室中绿色荧光标记的PBMC量分别为(0.445±0.021)%、(21.180±4.653)%、(34.830±7.156)%和(64.185±3.161)%，随着培养时间的延长，下室中检测到的标有绿色荧光的PBMC量越多(F ＝68.983，P＝0.001)。共培养24、48 h时，下室PBMC HBV DNA分别为(1.925±0.431)×103、(2.565±0.361)×103拷贝/mL，即下室中的PBMC发生感染。
结论PBMC可以作为HBV肝外感染的靶细胞，利用transwell小室构建胎盘滋养层屏障可以为体外研究HBV跨胎盘传播提供新思路。