快速准确检测Tim分子表达方法的建立

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目的 建立快速准确检测外周血单个核细胞中Tim分子表达的方法,为进一步建立乙肝新型检测指标奠定基础.方法 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),Trizol法抽提总RNA,分别进行常规RT-PCR及荧光定量RT-PCR,比较两种方法检测结果.结果 常规RT-PCR成功扩增人Tim-1及Tim-3,可见清晰条带.荧光定量RT-PCR扩增目的基因融解曲线良好,Tim-1在中、重度慢性肝炎病人中的表达显著高于正常对照组(P<0.05),Tim-3在急性肝炎组中的表达显著高于正常对照组(P<0.01).结论 成功建立Tim分子表达的快速定量检测方法,有助于临床标本检测.
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