【摘 要】
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目的 观察环孢素A对慢性脑低灌注大鼠空间记忆的保护作用及其可能机制.方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、赋形剂组以及环孢素A干预小剂量组、中剂量组和大剂量组.采用双侧
【机 构】
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719000 榆林市第一医院神经内科710061 西安交通大学第一附属医院神经内科;710061,西安交通大学第一附属医院神经内科;
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目的 观察环孢素A对慢性脑低灌注大鼠空间记忆的保护作用及其可能机制.方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、赋形剂组以及环孢素A干预小剂量组、中剂量组和大剂量组.采用双侧颈总动脉永久结扎法制备慢性脑低灌注模型.模型制作后第46天起,假手术组和赋形剂组给予橄榄油1 ml/d灌胃,小剂量组、中剂量组和大剂量环孢素组分别给予环孢素A 3 mg/kg、6 mg/kg和12 mg/kg灌胃,1次/d,连用14 d.采用Morris水迷宫实验检测空间记忆能力,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大脑皮质NADPH氧化酶4(NADPHoxidase 4,NOX4) mRNA表达,免疫组化染色和蛋白质印迹法检测大脑皮质NOX4蛋白表达.结果 Morris水迷宫实验显示,各环孢素组逃避潜伏期均显著短于赋形剂组(P均＜0.05).免疫组化染色显示,假手术组、赋形剂组、小剂量、中剂量和大剂量环孢素A组NOX4阳性细胞百分比分别为(4.43±0.37)％、(37.44±4.76)％、(18.05±2.91)％、(12.51±3.4)％和(11.06± 1.74)％ (F=262.021,P＜0.001),其中赋形剂组显著高于假手术组(P＜0.01),各环孢素A组均显著少于赋形剂组(P均＜0.01).RT-PCR显示,假手术组、赋形剂组、小剂量、中剂量和大剂量环孢素A组大脑皮质NOX4 mRNA相对表达水平分别为0.36±0.03、1.04±0.04、0.58±0.02、0.49±0.01和0.40±0.02(F=1 324.941,P＜0.001),各环孢素A组均显著低于赋形剂组(P均＜0.01).蛋白质印迹分析显示,假手术组、赋形剂组、小剂量、中剂量和大剂量环孢素A组大脑皮质NOX4蛋白表达水平分别为0.02 ±0.01、0.27±0.04、0.09±0.02、0.06±0.02和0.06±0.01(F=222.692,P＜0.001),各环孢素A组均显著低于赋形剂组(P均＜0.01).结论 环孢素A可能通过下调NOX4改善慢性脑低灌注大鼠空间记忆能力.
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