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【摘 要】 目的：研究沙苑子对急性化学性肝损伤的保护作用。方法：各药物组灌胃相应药物，正常对照组与模型组灌胃生理盐水，1次/d，共7d。末次给药后1h，除正常对照组外，其余各组以小鼠腹腔注射0.1mL/10g体重的10%四氯化碳油溶液制备急性肝损伤模型24h后，检测各组小鼠血清AST、ALT活性及肝组织中CAT、GSH活性变化。结果：与模型组比较，沙苑子在300mg生药/kg体重剂量下，可明显降低AST、ALT活性（P<0.05）；并显著升高CAT、GSH活性（P<0.01）。结论：沙苑子对四氯化碳致小鼠急性化学性肝损伤有一定的保护作用。
【关键词】 沙苑子；急性肝损伤；四氯化碳
【中图分类号】R-332 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2018）07-0019-02
Abstract：Objective To study the protective effect of Semen Astragali Complanati for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.Methods All animals were given different doses of Semen Astragali Complanati，then the acute liver damage model were prepared. The contents of ALT、AST in serum of all animals and the activity of CAT、GSH in the liver of the acute liver injury animals inducted by carbon tetrachloride. Results Compared with animals model group， Semen Astragali Complanati could significantly reduced the active of AST， ALT（P<0.05）at the dosage of 300mg/kg；the activities of CAT and GSH in the carbon tetrachloride-injured liver were significantly increased（P<0.01）.Conclusion Semen Astragali Complanati have the protective effect for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.
Keywords：Semen Astragali Complanati；Acute Liver Damage；Carbon Tetrachloride
沙苑子来源于豆科（Leguminosee）植物扁茎黄芪Astragalus complanatus R.Br.的干燥成熟种子，其性味甘温，归肝、肾二经，具有养肝明目、补肾助阳、固精缩尿止带的功效。实验以四氯化碳制备小鼠急性化学性肝损伤模型，研究沙苑子的保肝作用，以期为肝病的防治，提供更为广泛的药源。
1 材料
1.1 动物 SPF级昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，由陕西省中医药研究院实验动物中心提供，动物合格证号是陕医动证字第08-025号。
1.2 药物 沙苑子购于华芝堂药店，经渭南职业技术学院孙教授鉴定为正品沙苑子，然后制备成浓度为600mg生药/mL、300mg生药/mL、150mg生药/mL的水煎液，按1mL/kg体重的剂量给药，分为三个计量组：高（600mg生药/kg体重）、中（300mg生药/kg体重）、低（150mg生药/kg体重）。双环醇片（规格25mg/片，批号：130815，北京协和药厂）。
1.3 试剂 四氯化碳（CCL4，批号：20151030，广州光华化学厂有限公司）制备成10%的花生油油剂。丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。
1.4 仪器 UV-754紫外可见分光光度计（上海科学精密仪器有限公司）。
2 方法
2.1 分组 将小鼠随机分为6组，每组10只，即正常对照组，模型组，双环醇阳性对照组，沙苑子高（600mg生药/kg体重）、中（300mg生药/kg体重）、低（150mg生药/kg体重）剂量组。
2.2 试验方法 除正常对照组与模型组灌胃生理盐水，其余药物组灌胃相应药物，1次/d，连续7d。末次灌胃后1h，除正常对照组外，其余各组腹腔注射四氯化碳花生油油剂造模24h，眼眶静脉采血，静置1h，3000rpm离心10min，取血清100μL，测定ALT、AST活性。取小鼠肝脏，用生理盐水制成10%的肝组织匀浆，离心，取上清，测定CAT、GSH活性。
2.3 统计方法 采用SPSS13.0统计分析软件处理数据，计量资料以均数加减标准差（x±s）表示，采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
与正常组对比，模型组ALT、AST显著升高（P<0.01），CAT、GSH显著降低（P<0.01），说明模型制备成功。沙苑子高剂量组可降低血清ALT（P<0.05），降低AST但无统计学差异（P>0.05），升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01）；中剂量组与双环醇阳性对照组均可降低血清ALT（P<0.01），降低AST（P<0.05），升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01）；低剂量组对四氯化碳引起的小鼠血清ALT、AST升高均无明显作用（P>0.05），但可以显著升高肝组织中CAT活性（P<0.01）。见表1。
4 讨论
反应肝脏毒性的血清酶指标是丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST），二者存在于机体肝细胞内，当肝细胞细胞膜结构破坏，通透性改变，可从细胞内逸出而进入血液循环[1]。研究表明[2]氧化应激能够损伤肝细胞，在肝脏疾病中起重要作用。大量的ROS可氧化不饱和脂质导致脂质过氧化，加剧线粒体功能障碍。此外，抗氧化物质的缺乏使ROS灭活障碍，进一步增加ROS对线粒体的损伤作用，致使AST、ALT流出细胞，消耗细胞内的抗氧化物质，导致过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）缺乏，形成恶性循环，从而引起肝脏疾病。试验结果显示以300mg生药/kg体重沙苑子灌胃给药，可达到阳性对照药双环醇的效果，均能显著降低血清ALT（P<0.01），降低AST（P<0.05），显著升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01），表明沙苑子在300mg生药/kg体重剂量下，可通过升高肝组织中CAT、GSH活性来降低AST、ALT，以达到保护肝脏免受CCL4所致的急性化学性损伤，其机制还需后续深入研究。
参考文献
[1]Jain AK，Jaiswal AK.Phosphorylation of tyrosine 568 controis nuclear export of nrf2[J].J Biol Chem，2006， 281（17） ∶12132-12142.
[2]Matsuzawa NN，Takamura T，Ando H，et al.Increased oxidative stress precedes the onsetofhigh-fatdiet-induced insulin resistance and obesity[J].Metabolism，2008，57（8） ∶1071-1077.
（收稿日期：2012-02-27 编辑：程鹏飞）
【关键词】 沙苑子；急性肝损伤；四氯化碳
【中图分类号】R-332 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2018）07-0019-02
Abstract：Objective To study the protective effect of Semen Astragali Complanati for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.Methods All animals were given different doses of Semen Astragali Complanati，then the acute liver damage model were prepared. The contents of ALT、AST in serum of all animals and the activity of CAT、GSH in the liver of the acute liver injury animals inducted by carbon tetrachloride. Results Compared with animals model group， Semen Astragali Complanati could significantly reduced the active of AST， ALT（P<0.05）at the dosage of 300mg/kg；the activities of CAT and GSH in the carbon tetrachloride-injured liver were significantly increased（P<0.01）.Conclusion Semen Astragali Complanati have the protective effect for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.
Keywords：Semen Astragali Complanati；Acute Liver Damage；Carbon Tetrachloride
沙苑子来源于豆科（Leguminosee）植物扁茎黄芪Astragalus complanatus R.Br.的干燥成熟种子，其性味甘温，归肝、肾二经，具有养肝明目、补肾助阳、固精缩尿止带的功效。实验以四氯化碳制备小鼠急性化学性肝损伤模型，研究沙苑子的保肝作用，以期为肝病的防治，提供更为广泛的药源。
1 材料
1.1 动物 SPF级昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，由陕西省中医药研究院实验动物中心提供，动物合格证号是陕医动证字第08-025号。
1.2 药物 沙苑子购于华芝堂药店，经渭南职业技术学院孙教授鉴定为正品沙苑子，然后制备成浓度为600mg生药/mL、300mg生药/mL、150mg生药/mL的水煎液，按1mL/kg体重的剂量给药，分为三个计量组：高（600mg生药/kg体重）、中（300mg生药/kg体重）、低（150mg生药/kg体重）。双环醇片（规格25mg/片，批号：130815，北京协和药厂）。
1.3 试剂 四氯化碳（CCL4，批号：20151030，广州光华化学厂有限公司）制备成10%的花生油油剂。丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。
1.4 仪器 UV-754紫外可见分光光度计（上海科学精密仪器有限公司）。
2 方法
2.1 分组 将小鼠随机分为6组，每组10只，即正常对照组，模型组，双环醇阳性对照组，沙苑子高（600mg生药/kg体重）、中（300mg生药/kg体重）、低（150mg生药/kg体重）剂量组。
2.2 试验方法 除正常对照组与模型组灌胃生理盐水，其余药物组灌胃相应药物，1次/d，连续7d。末次灌胃后1h，除正常对照组外，其余各组腹腔注射四氯化碳花生油油剂造模24h，眼眶静脉采血，静置1h，3000rpm离心10min，取血清100μL，测定ALT、AST活性。取小鼠肝脏，用生理盐水制成10%的肝组织匀浆，离心，取上清，测定CAT、GSH活性。
2.3 统计方法 采用SPSS13.0统计分析软件处理数据，计量资料以均数加减标准差（x±s）表示，采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
与正常组对比，模型组ALT、AST显著升高（P<0.01），CAT、GSH显著降低（P<0.01），说明模型制备成功。沙苑子高剂量组可降低血清ALT（P<0.05），降低AST但无统计学差异（P>0.05），升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01）；中剂量组与双环醇阳性对照组均可降低血清ALT（P<0.01），降低AST（P<0.05），升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01）；低剂量组对四氯化碳引起的小鼠血清ALT、AST升高均无明显作用（P>0.05），但可以显著升高肝组织中CAT活性（P<0.01）。见表1。
4 讨论
反应肝脏毒性的血清酶指标是丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST），二者存在于机体肝细胞内，当肝细胞细胞膜结构破坏，通透性改变，可从细胞内逸出而进入血液循环[1]。研究表明[2]氧化应激能够损伤肝细胞，在肝脏疾病中起重要作用。大量的ROS可氧化不饱和脂质导致脂质过氧化，加剧线粒体功能障碍。此外，抗氧化物质的缺乏使ROS灭活障碍，进一步增加ROS对线粒体的损伤作用，致使AST、ALT流出细胞，消耗细胞内的抗氧化物质，导致过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）缺乏，形成恶性循环，从而引起肝脏疾病。试验结果显示以300mg生药/kg体重沙苑子灌胃给药，可达到阳性对照药双环醇的效果，均能显著降低血清ALT（P<0.01），降低AST（P<0.05），显著升高肝组织中CAT、GSH活性（P<0.01），表明沙苑子在300mg生药/kg体重剂量下，可通过升高肝组织中CAT、GSH活性来降低AST、ALT，以达到保护肝脏免受CCL4所致的急性化学性损伤，其机制还需后续深入研究。
参考文献
[1]Jain AK，Jaiswal AK.Phosphorylation of tyrosine 568 controis nuclear export of nrf2[J].J Biol Chem，2006， 281（17） ∶12132-12142.
[2]Matsuzawa NN，Takamura T，Ando H，et al.Increased oxidative stress precedes the onsetofhigh-fatdiet-induced insulin resistance and obesity[J].Metabolism，2008，57（8） ∶1071-1077.
（收稿日期：2012-02-27 编辑：程鹏飞）