论文部分内容阅读
【摘要】 目的：探討甲强龙对新生大鼠高氧肺损伤的保护与治疗。方法：选的Wistar大鼠150只，随机分为空气对照组，高氧模型组，甲强龙治疗组，在实验开始第3天、7天、14天时每组处死10只动物，用于免疫组织化学染色法观察肺组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和白介素-11（IL-11）的表达。结果：高氧组小鼠第3、7、14天时MMP-9和IL-11的表达强于正常组和治疗组，有显著差异（P<0.01）。结论：甲强龙对高氧肺损伤的进展有保护抑制及治疗作用。
【关键词】 高氧性肺损伤；甲强龙；基质金属蛋白酶；白介素
氧气是许多疾病特别是缺氧性疾病的重要救治手段，但是长时间的吸入氧气必会引起肺的氧化应激损害，引发肺组织慢性疾病，影响生活质量，但具体发生机制尚不清楚，就目前研究来看，其过程认为首先出现氧自由基的损伤作用，即炎症反应，随时间延长，逐渐转为肺的纤维化。如何抑制这一过程也越来越多的被探讨。现就注射用激素甲强龙实验性应用于实验动物来观察疗效，以讨论是否对肺损伤有一定的抑制作用。静注用甲强龙属于合成的糖皮质激素，具有强力抗炎作用，被用作为大部份之治疗用途，因其可以减少发炎部位免疫作用细胞之数目，减少血管扩张，稳定溶酶体膜，抑制吞噬作等。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 新生Wistar大鼠150只，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和白介素-11（IL-11）。高氧模型箱自通气孔持续放入浓度100%的医用氧气，测氧仪持续监测以保证箱内氧气浓度维持在90%以上。模型箱内放置碱石灰吸收CO2和水。模型箱每天开箱1小时，更换垫料，检测母鼠护理能力。
1.2 实验动物处理 3组动物分别在实验开始第3天、7天、14天时每组处死10只，取肺组织，置于10%福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片厚4um，用于免疫组织化学染色（SABC）法。将免疫组织化学染色的玻片对抗体表达强度行半定量评分，并按下标准判断：0分：细胞未着色；1分：散在细胞着色（浅黄色）；2分：弥漫性弱阳性着色（浅棕黄色）；3分：弥漫性中等强度着色（棕黄色）；4分：弥漫性强阳性着色（棕褐色）。
1.3 统计学处理 所得数据均采用SPSS15.0软件分析，各组的MMP-9和IL-11指标用平均值表示，各组间差异用t检验方法，取P<0.05为有显著性检验标准。
2 结果
高氧组小鼠第3、7、14天时MMP-9和IL-11的表达强于正常组和治疗组，有显著差异（P<0.01），见表1。
表1 三组MMP-9、IL-11表达比较
*：与高氧组相比P<0.01
3 讨论
MMPs是一组依赖锌离子的中性蛋白酶，在肺形态发生、发育及损伤后修复中发挥关键作用[1]。有研究发现，高氧肺损伤时MMPs/TIMPs表达的失衡是导致肺发育受阻和肺纤维化的重要因素[2]。本实验结果显示在空气对照组新生大鼠肺组织内仅有散在阳性表达，高氧模型组在3天时表达强度开始增加，7天时达高峰，14天时表达强度有所下降，但仍高于空气对照组。提示高氧所引起的肺发育受阻与MMPs-9相关。
L-11作为一种细胞因子，具有极强的抗炎作用和免疫抑制作用，在肺损伤的过程中，IL-11的表达会降低。在暴露于高氧环境中第一天表达升高，且达到最高峰，考虑是对机体遭受炎症攻击的一种保护性、代偿性反应，之后逐渐下降。已经有大量的实验证明IL-11对于肺损伤的保护作用：在高氧肺损伤模型中，肺组织内IL-10 mRNA及蛋白水平升高，若给与相关的阻断剂进行干预，则肺损伤较之前加重[3]。
实验结果显示治疗组MMP-9及IL-11的表达均较高氧组减弱，对于高氧损伤的肺组织，甲强龙有一定的抑制炎症及保护治疗作用。甲强龙能清除氧离子自由基，具有较好的平衡炎性因子，促进炎性细胞凋亡，减低呼吸爆发等作用，本次试验结果治疗组肺组织的病理改变较高氧组减轻，肺泡渗出与间质水肿均得到良好改善，阻断肺进行性纤维化，具有一定的保护作用。
参考文献
［1］Nagase H , Visse R , Murphy G. Structure and function of matrix metalloproteinases and TIMPs [J]. Cardiovasc Res ,2006,69(3):562-573.
［2］Dik WA.De Krejger RR,Bonekamp L, et al. Localization and potential role matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitors of metalloproteinase-1 and-2 in different phases of broonchopulmonary dysplasia[J].Pediatr Res,2001,50(60):761-766.
［3］Shanley TP．Schmal H，Friedl HP，et a1．Regulatory effects of intrinsic IL-l0 in IgG immune complex-indueed lung injury[J]. J Immunol,1995,154:3454-3460
【关键词】 高氧性肺损伤；甲强龙；基质金属蛋白酶；白介素
氧气是许多疾病特别是缺氧性疾病的重要救治手段，但是长时间的吸入氧气必会引起肺的氧化应激损害，引发肺组织慢性疾病，影响生活质量，但具体发生机制尚不清楚，就目前研究来看，其过程认为首先出现氧自由基的损伤作用，即炎症反应，随时间延长，逐渐转为肺的纤维化。如何抑制这一过程也越来越多的被探讨。现就注射用激素甲强龙实验性应用于实验动物来观察疗效，以讨论是否对肺损伤有一定的抑制作用。静注用甲强龙属于合成的糖皮质激素，具有强力抗炎作用，被用作为大部份之治疗用途，因其可以减少发炎部位免疫作用细胞之数目，减少血管扩张，稳定溶酶体膜，抑制吞噬作等。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 新生Wistar大鼠150只，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和白介素-11（IL-11）。高氧模型箱自通气孔持续放入浓度100%的医用氧气，测氧仪持续监测以保证箱内氧气浓度维持在90%以上。模型箱内放置碱石灰吸收CO2和水。模型箱每天开箱1小时，更换垫料，检测母鼠护理能力。
1.2 实验动物处理 3组动物分别在实验开始第3天、7天、14天时每组处死10只，取肺组织，置于10%福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片厚4um，用于免疫组织化学染色（SABC）法。将免疫组织化学染色的玻片对抗体表达强度行半定量评分，并按下标准判断：0分：细胞未着色；1分：散在细胞着色（浅黄色）；2分：弥漫性弱阳性着色（浅棕黄色）；3分：弥漫性中等强度着色（棕黄色）；4分：弥漫性强阳性着色（棕褐色）。
1.3 统计学处理 所得数据均采用SPSS15.0软件分析，各组的MMP-9和IL-11指标用平均值表示，各组间差异用t检验方法，取P<0.05为有显著性检验标准。
2 结果
高氧组小鼠第3、7、14天时MMP-9和IL-11的表达强于正常组和治疗组，有显著差异（P<0.01），见表1。
表1 三组MMP-9、IL-11表达比较
*：与高氧组相比P<0.01
3 讨论
MMPs是一组依赖锌离子的中性蛋白酶，在肺形态发生、发育及损伤后修复中发挥关键作用[1]。有研究发现，高氧肺损伤时MMPs/TIMPs表达的失衡是导致肺发育受阻和肺纤维化的重要因素[2]。本实验结果显示在空气对照组新生大鼠肺组织内仅有散在阳性表达，高氧模型组在3天时表达强度开始增加，7天时达高峰，14天时表达强度有所下降，但仍高于空气对照组。提示高氧所引起的肺发育受阻与MMPs-9相关。
L-11作为一种细胞因子，具有极强的抗炎作用和免疫抑制作用，在肺损伤的过程中，IL-11的表达会降低。在暴露于高氧环境中第一天表达升高，且达到最高峰，考虑是对机体遭受炎症攻击的一种保护性、代偿性反应，之后逐渐下降。已经有大量的实验证明IL-11对于肺损伤的保护作用：在高氧肺损伤模型中，肺组织内IL-10 mRNA及蛋白水平升高，若给与相关的阻断剂进行干预，则肺损伤较之前加重[3]。
实验结果显示治疗组MMP-9及IL-11的表达均较高氧组减弱，对于高氧损伤的肺组织，甲强龙有一定的抑制炎症及保护治疗作用。甲强龙能清除氧离子自由基，具有较好的平衡炎性因子，促进炎性细胞凋亡，减低呼吸爆发等作用，本次试验结果治疗组肺组织的病理改变较高氧组减轻，肺泡渗出与间质水肿均得到良好改善，阻断肺进行性纤维化，具有一定的保护作用。
参考文献
［1］Nagase H , Visse R , Murphy G. Structure and function of matrix metalloproteinases and TIMPs [J]. Cardiovasc Res ,2006,69(3):562-573.
［2］Dik WA.De Krejger RR,Bonekamp L, et al. Localization and potential role matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitors of metalloproteinase-1 and-2 in different phases of broonchopulmonary dysplasia[J].Pediatr Res,2001,50(60):761-766.
［3］Shanley TP．Schmal H，Friedl HP，et a1．Regulatory effects of intrinsic IL-l0 in IgG immune complex-indueed lung injury[J]. J Immunol,1995,154:3454-3460