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摘要：目的：了解黄山市无创产前检测技术（noninvasive prenatal test，NIPT）各分类指征开展情况和阳性验证，探讨其在胎儿产前检测中应用价值。方法：回顾性选择2015年1月—2019年12月我院产前筛查中心接受NIPT检测的3231例孕妇为观察对象，NIPT结果高风险的孕妇建议行羊膜腔穿刺行胎儿核型分析，并对检测结果进行分析;经电话随访获知孕妇妊娠期结局。结果：分指征统计选择NIPT检测人数依次是血清学筛查异常组39.90%（1289/3231），高龄组35.59%（1150/32310），本人要求组24.51%（792/3231），检测共提示高风险42例，阳性率1.30%（42/3231）。.结论：NIPT技术有助于我市产前筛查水平，减少直接产前诊断人数，对21三体的筛查有较高的阳性预测值，对18三体，性染色体非整倍体异常筛查项较好，但避免不了假阳性情况，因此对NIPT高风险的孕妇有必要进行侵入性产前诊断。
关键词：产前筛查;非整倍体;核型分析;孕妇;三体性
【中图分类号】R828.2 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2020）01-076-02
染色体非整倍体异常是导致胎儿出生缺陷的常见原因 之一，多数无有效治疗方法，在新生儿中发病率为0.1%-0.2%，（1）其中以唐氏综合征（21三体），爱德华综合征（18三体），帕陶氏综合征（13三体）以及性染色体非整倍体疾病最为常见。中孕期血清学检查是最常用的检测方法，其准确率60-70%，漏诊率30-40%，存在较高假阳性和假阴性。本研究回顾性分析了黄山市妇幼保健院产筛门诊自2015年1月至2019年12月共3231例自愿行NIPT孕妇的产前筛查，产前诊断结果及妊娠结局，探讨分析NIPT技术在胎儿非整倍体染色体疾病中的应用价值，现汇报如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2015年1月28日至2019年12月31日在黄山市妇幼保健院产前筛查中心自愿接受NIPT检测的孕妇3231例。孕妇年龄在19至50岁，孕周15至22周之间
1.2纳入标准1：妊娠孕周经B超校准后实际孕周在15周到22周之间。2：单活胎3：近期未接受过细胞治疗，移值手术 异体输血等;4：体质量低于100kg.4：通过B超初筛，有软指标异常者首选羊穿，充分遗传学咨询后要求做的也纳入。5：所有参与检测孕妇充分咨询后，签书面同意书。
1.2排除标准：1：孕妇为染色体异常者。2怀多胎者。3孕妇接受过细胞治疗，移值手术，一年内输过异体血制品4两次及两次以上自然流产史5：四周内接受过免疫治疗
1.3：方法：选用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝的采血管采集孕妇外周血10ml，0-4摄氏度低温保存 ，24小时内送第三方基因检测机构进行基因组测序。最后生物信息学分析不同染色体水平差异识别胎儿染色体异常，并计算出每条染色体的Z值 ，检测结果Z值在-3-3之间为正常，超出此范围为高风险，高风险者建议行羊水穿刺做染色体核型分析。
1.4统计学分析：采用SPSS16.0软件进行统计学分析。定量资料用均数+.—标准差（x+-s）表示，组间比较采用t检验;定性资料用率（%）表示。
2 结果
2.1NIPT检测原因分析：行无创产前筛查的中孕期孕妇有3231例，其中血清学筛查异常组有1289例，占总比39.89%.高龄组1150例，占总比35.59%。最后是无明确指征本人要求做的（本人要求组）孕妇数792例，占总比24.51%。本研究归类显示无创DNA检测数逐年提高，2019年总数是2018年的（1691/746）2.27倍
2.2回访情况：所有NIPT高风险的都给予充分遗传学咨询，其中30例行羊水穿刺，羊水行染色体核型分析。14例21三体的孕妇行羊水穿刺11例，确诊10例，阳性预测值90.90%.3例未行羊水穿刺的一胎羊穿失败，血性羊水未培养出染色体，拒绝再次羊水穿刺，怀孕中。一例无创DNA未出报告时B超提示胎儿全身水肿胸腔大量积液，行引产，另一例未行进一步检查直接引产。4例18三体高风险孕妇，行羊水穿刺3例，确诊一例引产，阳性预测值33.33%.不相符2例，回访至宝宝出生正常。还有一例未进一步检查直接引产。2例13三体高风险羊穿都排除，回访宝宝出生正常。9例性染色体体异常的羊穿数8例，确诊3例阳性预测值37.75%，另5例回访至宝宝出生，宝宝正常。其他染色体异常13例，行羊水穿刺6例，确诊2例阳性预测值33.33%，11例宝宝回访活产正常
3讨论
3.1自我要求NIPT检测的孕妇构成比：无明确指征本人要求组绝对数从每年39人递增到2019年的筛查数503人，占年筛查NIPT比例越来越高。此组NIPT阳性率1.26%，比唐筛异常组高，估计跟有异常妊娠史珍贵儿的孕妇纳入此组有关，异常妊娠史珍贵儿孕妇更愿意直接选择NIPT.一直以来NIPT是作为血清学筛查序贯检测的，而现在越来越多的无明确指征的孕妇选择直接无创DNA检测跟估计跟如下原因有关：首先NIPT對21三体的准确性90%以上是得到业界认可的，本研究21三体18三体.阳性预测值是90.91%，33.33%.21三体是最常见的染色体非整倍体疾病，21三体孩子生命周期长，家庭经济和心理负担重。其次：近年一些大型基因检测公司在全国各地对NIPT技术进行推广，检测费用相对减少，使得很多孕妇对此检测技术的接受度大幅度提高.2019年检测数1691例，占五年来总数的52.34%。检测数大幅度提高，带来的规范咨询，指征正确把握，检测高风险准确处理，低风险的回访等等给临床带来一定挑战，怎么规范系统的管理是下步研究的问题。 3.2：高龄问题：本研究中，高龄占总NIPT数的35.34%，高风险率占总风险率的45.24%，其发生主要是由于高龄孕妇长期受内外因素的影响，卵巢渐趋老化，减数分裂时发生染色体不分离的机率逐渐增高。羊膜腔穿刺采集羊水（绒毛 / 脐血） 进行核型分析的方式一直视为产前诊断金标准，目前≥ 35 岁的孕妇按照法律规定是直接进行产前诊断的指征，产前诊断手术有创同时流产风险等，往往孕妇在面对产前诊断时极易产生焦虑与恐惧降低产前诊断依从性，这部分高龄孕妇在知情同意需做产前诊断的情况下，更愿意选择先进行无创DNA检测，同时无创 DNA 会为每位进行检测的孕妇购买保险，即使无创检测为高风险，后续再做羊水穿刺时还能报销费用，也缓解了一部分因为费用而放弃产前诊断检测的孕妇例数。
3.3：血清学检测和NIPT关系：目前的血清学标志物筛查阳性率较高（约为6% ）左右，本研究中 1245例血清学筛查异常选择NIPT 检测，结果共12例阳性，阳 性 率 为 0.96%，避免了绝大多数孕妇进行不必要的有创性产前诊断操作。本研究中用 NIPT 检 测出14 例 T21、4 例 T18、2 例 T13、8 例性染色体异 常，13例其他染色体异常，经羊水染色体核型分析证实 10例 T21、1 例 T18、3 例性染色体异常，故NIPT 檢测存在 5 例假阳性，（有2例13三体全是假阳问题，估计跟样本量小有关性。
综上所述，产前无创筛查技术在灵敏度和特异度上比传统的血清唐氏筛查要高。随着高通量测序技术的进步和检测成本的降低，NIPT 的临床应用前景可观，NIPT 有望成为我国广泛开展的产前筛查方法之一。从目前资料显示，假阳问题在目前技术条件下不可避免，所以NIPT阳性仍需要经羊膜腔穿刺术等侵入性产前诊断进一步验证，这也是NIPT定位为产前筛查的重要原因。
参考文献：
[1]王海 周蓉等 大规模平行测序基因检测用于胎儿染色体非整倍体异常产前诊断的临床价值 浙江医学，2018，40（1）（13-14）
[2]第八版妇产科学 第十四章 遗传咨询、产前筛查、产前诊断与胎儿干预162页
[3]郭彩茹 等胎儿染色体非整倍体无创检测在高危孕妇产前诊断中的应用 中国生育健康杂志2019 30（5）485-486
关键词：产前筛查;非整倍体;核型分析;孕妇;三体性
【中图分类号】R828.2 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2020）01-076-02
染色体非整倍体异常是导致胎儿出生缺陷的常见原因 之一，多数无有效治疗方法，在新生儿中发病率为0.1%-0.2%，（1）其中以唐氏综合征（21三体），爱德华综合征（18三体），帕陶氏综合征（13三体）以及性染色体非整倍体疾病最为常见。中孕期血清学检查是最常用的检测方法，其准确率60-70%，漏诊率30-40%，存在较高假阳性和假阴性。本研究回顾性分析了黄山市妇幼保健院产筛门诊自2015年1月至2019年12月共3231例自愿行NIPT孕妇的产前筛查，产前诊断结果及妊娠结局，探讨分析NIPT技术在胎儿非整倍体染色体疾病中的应用价值，现汇报如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2015年1月28日至2019年12月31日在黄山市妇幼保健院产前筛查中心自愿接受NIPT检测的孕妇3231例。孕妇年龄在19至50岁，孕周15至22周之间
1.2纳入标准1：妊娠孕周经B超校准后实际孕周在15周到22周之间。2：单活胎3：近期未接受过细胞治疗，移值手术 异体输血等;4：体质量低于100kg.4：通过B超初筛，有软指标异常者首选羊穿，充分遗传学咨询后要求做的也纳入。5：所有参与检测孕妇充分咨询后，签书面同意书。
1.2排除标准：1：孕妇为染色体异常者。2怀多胎者。3孕妇接受过细胞治疗，移值手术，一年内输过异体血制品4两次及两次以上自然流产史5：四周内接受过免疫治疗
1.3：方法：选用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝的采血管采集孕妇外周血10ml，0-4摄氏度低温保存 ，24小时内送第三方基因检测机构进行基因组测序。最后生物信息学分析不同染色体水平差异识别胎儿染色体异常，并计算出每条染色体的Z值 ，检测结果Z值在-3-3之间为正常，超出此范围为高风险，高风险者建议行羊水穿刺做染色体核型分析。
1.4统计学分析：采用SPSS16.0软件进行统计学分析。定量资料用均数+.—标准差（x+-s）表示，组间比较采用t检验;定性资料用率（%）表示。
2 结果
2.1NIPT检测原因分析：行无创产前筛查的中孕期孕妇有3231例，其中血清学筛查异常组有1289例，占总比39.89%.高龄组1150例，占总比35.59%。最后是无明确指征本人要求做的（本人要求组）孕妇数792例，占总比24.51%。本研究归类显示无创DNA检测数逐年提高，2019年总数是2018年的（1691/746）2.27倍
2.2回访情况：所有NIPT高风险的都给予充分遗传学咨询，其中30例行羊水穿刺，羊水行染色体核型分析。14例21三体的孕妇行羊水穿刺11例，确诊10例，阳性预测值90.90%.3例未行羊水穿刺的一胎羊穿失败，血性羊水未培养出染色体，拒绝再次羊水穿刺，怀孕中。一例无创DNA未出报告时B超提示胎儿全身水肿胸腔大量积液，行引产，另一例未行进一步检查直接引产。4例18三体高风险孕妇，行羊水穿刺3例，确诊一例引产，阳性预测值33.33%.不相符2例，回访至宝宝出生正常。还有一例未进一步检查直接引产。2例13三体高风险羊穿都排除，回访宝宝出生正常。9例性染色体体异常的羊穿数8例，确诊3例阳性预测值37.75%，另5例回访至宝宝出生，宝宝正常。其他染色体异常13例，行羊水穿刺6例，确诊2例阳性预测值33.33%，11例宝宝回访活产正常
3讨论
3.1自我要求NIPT检测的孕妇构成比：无明确指征本人要求组绝对数从每年39人递增到2019年的筛查数503人，占年筛查NIPT比例越来越高。此组NIPT阳性率1.26%，比唐筛异常组高，估计跟有异常妊娠史珍贵儿的孕妇纳入此组有关，异常妊娠史珍贵儿孕妇更愿意直接选择NIPT.一直以来NIPT是作为血清学筛查序贯检测的，而现在越来越多的无明确指征的孕妇选择直接无创DNA检测跟估计跟如下原因有关：首先NIPT對21三体的准确性90%以上是得到业界认可的，本研究21三体18三体.阳性预测值是90.91%，33.33%.21三体是最常见的染色体非整倍体疾病，21三体孩子生命周期长，家庭经济和心理负担重。其次：近年一些大型基因检测公司在全国各地对NIPT技术进行推广，检测费用相对减少，使得很多孕妇对此检测技术的接受度大幅度提高.2019年检测数1691例，占五年来总数的52.34%。检测数大幅度提高，带来的规范咨询，指征正确把握，检测高风险准确处理，低风险的回访等等给临床带来一定挑战，怎么规范系统的管理是下步研究的问题。 3.2：高龄问题：本研究中，高龄占总NIPT数的35.34%，高风险率占总风险率的45.24%，其发生主要是由于高龄孕妇长期受内外因素的影响，卵巢渐趋老化，减数分裂时发生染色体不分离的机率逐渐增高。羊膜腔穿刺采集羊水（绒毛 / 脐血） 进行核型分析的方式一直视为产前诊断金标准，目前≥ 35 岁的孕妇按照法律规定是直接进行产前诊断的指征，产前诊断手术有创同时流产风险等，往往孕妇在面对产前诊断时极易产生焦虑与恐惧降低产前诊断依从性，这部分高龄孕妇在知情同意需做产前诊断的情况下，更愿意选择先进行无创DNA检测，同时无创 DNA 会为每位进行检测的孕妇购买保险，即使无创检测为高风险，后续再做羊水穿刺时还能报销费用，也缓解了一部分因为费用而放弃产前诊断检测的孕妇例数。
3.3：血清学检测和NIPT关系：目前的血清学标志物筛查阳性率较高（约为6% ）左右，本研究中 1245例血清学筛查异常选择NIPT 检测，结果共12例阳性，阳 性 率 为 0.96%，避免了绝大多数孕妇进行不必要的有创性产前诊断操作。本研究中用 NIPT 检 测出14 例 T21、4 例 T18、2 例 T13、8 例性染色体异 常，13例其他染色体异常，经羊水染色体核型分析证实 10例 T21、1 例 T18、3 例性染色体异常，故NIPT 檢测存在 5 例假阳性，（有2例13三体全是假阳问题，估计跟样本量小有关性。
综上所述，产前无创筛查技术在灵敏度和特异度上比传统的血清唐氏筛查要高。随着高通量测序技术的进步和检测成本的降低，NIPT 的临床应用前景可观，NIPT 有望成为我国广泛开展的产前筛查方法之一。从目前资料显示，假阳问题在目前技术条件下不可避免，所以NIPT阳性仍需要经羊膜腔穿刺术等侵入性产前诊断进一步验证，这也是NIPT定位为产前筛查的重要原因。
参考文献：
[1]王海 周蓉等 大规模平行测序基因检测用于胎儿染色体非整倍体异常产前诊断的临床价值 浙江医学，2018，40（1）（13-14）
[2]第八版妇产科学 第十四章 遗传咨询、产前筛查、产前诊断与胎儿干预162页
[3]郭彩茹 等胎儿染色体非整倍体无创检测在高危孕妇产前诊断中的应用 中国生育健康杂志2019 30（5）485-486