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目的 以犬新孢子虫Nc-5基因为目的基因的PCR诊断方法，检测奶牛流产的胎牛脑组织的新孢子虫。方法 根据GenBank发布的新孢子虫特异性基因片段Nc-5基因序列，设计1对特异性引物，以犬新孢子虫（Neospora caninum）标准株DNA为模板，PCR扩增Nc-5基因，与pMD18-T载体连接，转化大肠埃希菌JM109，获得阳性重组质粒pMD18-T-Nc-5，并测序。以环形泰勒虫、牛巴贝斯虫、刚地弓形虫、杜氏利什曼原虫以及犬新孢子虫标准株DNA为模板进行扩增以验证PCR的特异性，采用紫外分光光度计