【摘 要】
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现代发酵工业通常用高浓度糖作为培养物,然而由于蛋白酶A分泌过度,导致啤酒酿造过程中泡沫稳定性下降.为了更好地理解在高糖胁迫条件下酿酒酵母蛋白酶A分泌的特性,使用含高浓
【机 构】
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江南大学生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 214122
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现代发酵工业通常用高浓度糖作为培养物,然而由于蛋白酶A分泌过度,导致啤酒酿造过程中泡沫稳定性下降.为了更好地理解在高糖胁迫条件下酿酒酵母蛋白酶A分泌的特性,使用含高浓度葡萄糖的YNB培养基培养酵母,从培养基上分离出的蛋白酶A酶原(Pro-PrA)通过凝胶排阻色谱纯化,并使用荧光底物分析技术检测蛋白酶A (PrA)的活力.经过SDS-PAGE分离得出纯化的PrA和Pro-PrA的相对分子质量分别为42 kDa和54 kDa.这表明,在高浓度葡萄糖培养的条件下的PrA的代谢方式与正常条件下完全不同,而葡萄糖浓度可能对其分泌过程有很大的影响.进一步的研究表明,在高浓度葡萄糖条件下,PrA在细胞培养的对数生长期释放出来,且产量要比正常培养条件下高出1 1倍.在酸性条件下,PrA由自身激活.本研究证实了被称作pseudo-PrA的逐步自激活途径对于细胞外的PrA酶原的自激活过程发挥了主要作用.
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