建立超高效液相色谱-高分辨质谱法(UPLC-HRMS)同时测定动物源食品中苯基丁氮酮和氨基比林的分析方法。样品前处理使用改进的QuEChERS方法,考察多种溶剂体系,最终选择丙酮和水作为提取溶剂,Acquity UPLC HSS T3色谱柱(150mm×2.1mm,1.8μm)分离,以乙腈和乙酸铵溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子(ESI+)模式,全扫描模式进行检测。结果表明:苯基丁氮酮在5.0~100.0μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995),氨基比林在1.0~100.0μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995)。牛肉中两种非甾体类阵痛药都有较好的回收率和稳定性:5.0、10.0、20.0μg/kg的添加水平的回收率为76.7%~85.9%,相对标准偏差(RSD,n=6)为5.6%~12.9%。苯基丁氮酮和氨基比林的定量限(R SN=10)分别为5.0μg/kg和1.0μg/kg。该方法简单、快速、灵敏、准确,适合于动物源食品中苯基丁氮酮和氨基比林等非甾体类镇痛剂的快速、高灵敏的分析检测。