口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达

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利用RT-PCR技术,用包容口蹄疫病毒完整VP1基因的引物从口蹄疫分离株(China/99-2)中扩增得到一约750 bp的DNA片段,克隆后,经对该片段的核苷酸序列进行测序和同源性比较,显示其与国外同源参考序列(O1K/66)的同源性为80.44%,与国内同型参考株(HB/WH/99)的核苷酸序列的同源性达99.06%.随后以重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增得到目的基因VP1(650 bp),对目的基因和表达载体pGEX-4T-1分别以相同的限制性内切酶酶切后构建成重组表达载体,转化
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