临床分离肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子的结构与功能

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为了探索细菌多重耐药性的产生和播散的分子机制,文章对2002~2007年间179株临床分离的肺炎克雷伯菌进行耐药性、I类整合子可变区基因盒结构以及基因盒携带的耐药性基因进行分段克隆和耐药性功能测定。结果显示:65.9%(118/179)的肺炎克雷伯菌表现出对至少两种以上的抗生素(主要为β-内酰胺类、氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物)的耐药性;36.3%(65/179)的菌株检出单条或者双条I类整合子基因盒条带;对整合子阳性组与阴性组的耐药率进行比较发现,除氨基糖苷类、喹诺酮类和复方新诺明等药物的耐药性存在显著性差异(P<0.01)外,其余药物的差异不显著;共发现15种耐药基因构成形式的整合子基因盒,其中以dfrA17-aadA5最为多见,实验证明整合子可由接合转移耐药性质粒携带;对整合子基因盒(dhfr17-orfF-aadA2)分段克隆的耐药性功能研究发现,3个克隆重组子(pET28a-dhfr17、pET28a-dhfr17-orfF和pET28a-dhfr17-orfF-aadA2)对复方新诺明的抗性(MIC值)均为256μg/mL,重组子pET28a-dhfr17-orfF与重组子pET28a-dhfr17对链霉素的抗性无明显区别,和受体菌一样MIC值均为8μg/mL,而pET28a-dhfr17-orfF-aadA2对链霉素的抗性则明显提高,MIC值为256μg/mL。结果表明,I类整合子在肺炎克雷伯菌中较常见,携带氨基糖苷类和甲氧苄啶类的耐药基因盒在数量上占优势,且整合子携带的耐药基因具有耐药性功能,位于可水平转移耐药性质粒的耐药性基因相关的整合子对病原菌耐药性播散具有重要意义。
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